[Validado por KD] Anticuerpo monoclonal de conejo anti-ADAR1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P55265

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de ADAR1

• ADAR1 (también conocida como DRADA, p136, IFI-4) es una adenosina desaminasa específica de ARN bicatenario que cataliza la conversión de adenosina en inosina en el ARN bicatenario (edición de ARN A-to-I). Esta modificación postranscripcional puede alterar el reconocimiento de codones, el splicing, la estabilidad y la estructura del ARN.
  Referencias relacionadas:
  PMID:12618436
  PMID:7565688
  PMID:7972084

• La proteína desempeña un papel fundamental tanto en el metabolismo celular como en el metabolismo del ARN viral. Entre los sustratos celulares se incluyen los receptores de neurotransmisores (GRIA2, HTR2C, GABRA3) y la proteína asociada al cáncer de vejiga BLCAP, cuya edición modifica las secuencias de aminoácidos y las propiedades funcionales.

• ADAR1 presenta funciones duales en la infección viral: puede ejercer efectos antivirales (por ejemplo, inhibiendo la replicación del VHC mediante hiperedición) o efectos provirales (por ejemplo, potenciando la replicación de HDV, MV, VSV y VIH-1). Algunos efectos son independientes de la edición, como la supresión de la cinasa antiviral PKR/EIF2AK2.

• ADAR1 se expresa de forma ubicua, con los niveles más altos en el cerebro y los pulmones. La isoforma 5 está sobreexpresada en los astrocitomas y su expresión aumenta con el grado tumoral.
  Referencias relacionadas:
  PMID:7972084

• A nivel subcelular, ADAR1 se localiza en el citoplasma, el núcleo y el nucléolo, lo que refleja sus diversas funciones en el procesamiento del ARN y la inmunidad innata.

• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación, metilación y ubiquitinación, y contiene dominios de unión al zinc y al ARN. Las mutaciones en ADAR1 están asociadas con el síndrome de Aicardi-Goutières (AGS6), un trastorno autoinmunitario.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 610–810 de ADAR1 humano y se dirige a la región C-terminal. Para el Western blot, el peso molecular previsto es de aproximadamente 136 kDa, aunque pueden observarse bandas específicas de isoforma; valide utilizando controles positivos conocidos.
• Para la inmunohistoquímica (IHC-P) y la inmunofluorescencia (IF/ICC), considere optimizar la recuperación antigénica y la dilución del anticuerpo utilizando tejidos con una expresión elevada conocida (por ejemplo, cerebro o pulmón). La tinción conjunta con marcadores de orgánulos puede ayudar a confirmar la localización citoplasmática o nuclear.
• En aplicaciones de ELISA, combine el anticuerpo con un anticuerpo de captura o detección adecuado y valide en la matriz de muestra correspondiente para garantizar la especificidad hacia ADAR1.

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