[Validado por KD] Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-eIF4E para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P06730

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de eIF4E

• eIF4E (codificado por EIF4E; alias EIF4EL1, EIF4F) es una proteína de unión a la cap 5' de mRNA de 25 kDa y la subunidad esencial de reconocimiento de cap del complejo de iniciación de la traducción eIF4F, que impulsa la traducción dependiente de cap al facilitar el reclutamiento del complejo de preiniciación 43S al extremo 5' del mRNA. Referencias relacionadas: PMID:11606200 PMID:22578813 PMID:22684010
• Se une específicamente a la estructura de cap 7-metilguanosina (m7G) de los mRNA y promueve el desenrollamiento dependiente de ATP de estructuras secundarias terminales 5', un paso crítico para la unión y escaneo del ribosoma. Referencias relacionadas: PMID:16271312 PMID:22578813
• En el núcleo, eIF4E media la exportación de mRNA formando complejos con LRPPRC y XPO1; facilita el transporte nucleocitoplasmático de transcritos específicos como NOS2/iNOS y MDM2, influyendo así en su expresión citoplasmática. Referencias relacionadas: PMID:23471078 PMID:22684010
• En los cuerpos P citoplasmáticos, eIF4E participa en un complejo que secuestra mRNA inactivos traduccionalmente, previniendo su degradación y permitiendo su almacenamiento o reactivación traduccional posterior. Referencias relacionadas: PMID:24335285
• Junto con EIF4G1, eIF4E es necesario para la traducción dependiente de TISU (Iniciador de Traducción de UTR 5' Corto), un mecanismo sin escaneo que evita el requisito de escaneo promovido por eIF1. Referencias relacionadas: PMID:29987188
• eIF4E se localiza en múltiples compartimentos subcelulares: citoplasma (incluyendo cuerpos P y gránulos de estrés) y núcleo (speckles nucleares, cuerpos nucleares), una distribución que refleja sus funciones duales en traducción y exportación de ARN.
• La proteína se modifica postraduccionalmente por acetilación y fosforilación, lo que modula su afinidad de unión a cap y su interacción con socios de unión.
• La desregulación de eIF4E se asocia con el trastorno del espectro autista y la tumorigénesis, a menudo a través de reordenamientos cromosómicos o sobreexpresión que alteran los programas de traducción celular.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno se encuentra dentro de la región N-terminal (aa 1-100), un área no muy modificada; estos anticuerpos pueden detectar tanto eIF4E fosforilado como no fosforilado, pero los usuarios deben verificar la especificidad en sus propios sistemas.
• Para Western blot, espere una banda principal a ~25 kDa; el peso molecular reportado de eIF4E es de 25 kDa (teórico ~25.1 kDa), y puede aparecer como una banda única o doblete dependiendo del estado de fosforilación.
• En IHC-P, las condiciones de recuperación de antígeno (p. ej., tampón de citrato pH 6.0) deben optimizarse; los controles positivos incluyen tejidos con alta expresión de eIF4E como testículo, células proliferantes o ciertas secciones tumorales.
• Para inmunoprecipitación, use perlas de proteína A o G adecuadas para anticuerpos policlonales de conejo; el entrecruzamiento del anticuerpo a las perlas puede mejorar la recuperación de complejos de baja abundancia.
• IF/ICC puede revelar tinción tanto citoplasmática como nuclear; incluya pasos apropiados de permeabilización y bloqueo, y considere la tinción simultánea con marcadores de cuerpos P o nucleares para evaluar cambios de localización.

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