[KD Validado] Anticuerpo policlonal anti-FGFR3 para WB, FC y ELISA - P22607

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de FGFR3

• El receptor 3 del factor de crecimiento de fibroblastos (FGFR3), también denominado CD333, JTK4 y ACH, es miembro de la superfamilia de inmunoglobulinas de receptores tirosina cinasa. Mediante corte y empalme alternativo se generan múltiples isoformas, incluida una isoforma secretada (isoforma 3) que conserva la capacidad de unión al ligando.
• FGFR3 es un receptor de superficie celular que se une a los factores de crecimiento de fibroblastos, desencadenando cascadas de señalización intracelular que regulan la proliferación, diferenciación y apoptosis celulares. Es esencial para la diferenciación normal de los condrocitos y el desarrollo esquelético, y también modula la osteogénesis y la mineralización ósea posnatal.
• La unión al ligando activa vías clave: la fosforilación de PLCG1 produce segundos mensajeros; la fosforilación de FRS2 recluta GRB2/SOS1, lo que conduce a la activación de RAS-MAPK (ERK1/2), y también activa la vía de señalización de AKT1. Estas cascadas median diversos resultados celulares, incluida la apoptosis en los condrocitos y la proliferación en las células cancerosas.
• FGFR3 se localiza principalmente en la membrana plasmática, pero también se encuentra en vesículas citoplasmáticas y en el retículo endoplasmático. La isoforma secretada 3 puede interferir con la señalización de FGF al unirse extracelularmente a los ligandos.
• La expresión tisular incluye el cerebro, el riñón, los testículos y tejidos fetales como el pulmón, el intestino delgado y el riñón. La isoforma 2 se detecta en células epiteliales, mientras que la isoforma 1 se encuentra en células fibroblásticas.
• La desregulación de FGFR3, a menudo debida a mutaciones activadoras, está implicada en displasias esqueléticas (por ejemplo, acondroplasia y displasia tanatofórica), craneosinostosis y múltiples tipos de cáncer. El FGFR3 constitutivamente activo promueve la señalización de STAT1, STAT5 y PTPN11/SHP2, contribuyendo a la oncogénesis.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca la región extracelular (aminoácidos 23–375), presente en todas las isoformas unidas a la membrana y secretadas. Verifique la detección de las isoformas deseadas en su matriz de muestra consultando la literatura y utilizando controles específicos de isoforma.
• En Western blot, se esperan múltiples bandas entre 75 y 88 kDa debido a la glicosilación diferencial y a la expresión de las isoformas. Optimice los controles de carga y considere el uso de enzimas de desglicosilación para confirmar la especificidad.
• Para la citometría de flujo, utilice células no permeabilizadas para dirigirse al FGFR3 de superficie. Incluya un control de isotipo adecuado y valide los resultados con líneas celulares que sobreexpresen FGFR3 o presenten silenciamiento mediante siRNA.
• En ELISA, la isoforma secretada 3 puede competir por los anticuerpos de captura o detección. Realice una preclarificación de los sobrenadantes de cultivo o utilice pares de anticuerpos monoclonales/policlonales diseñados contra epítopos no superpuestos.

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