[Validado por KD] Anticuerpo monoclonal de conejo anti-METTL3 para WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q86U44

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de METTL3

• METTL3 es la subunidad catalítica del complejo heterodimérico de N6-adenosina-metiltransferasa METTL3-METTL14 que introduce modificaciones m6A en el ARN (PubMed:22575960, PubMed:24284625, PubMed:25719671, PubMed:27281194, PubMed:27373337, PubMed:27627798). Referencias relacionadas: PMID:22575960, PMID:24284625, PMID:25719671, PMID:27281194, PMID:27373337, PMID:27627798
• La metilación m6A promueve la desestabilización y degradación del ARNm, actuando como regulador clave del recambio de ARNm (PubMed:28637692). Referencias relacionadas: PMID:28637692
• La metilación m6A mediada por METTL3 participa en la respuesta al daño del ADN al modificar rápidamente los transcritos de poli(A) en los sitios de daño inducidos por UV, reclutando a POLK (PubMed:28297716). Referencias relacionadas: PMID:28297716
• METTL3 contribuye a la regulación del reloj circadiano y el metabolismo lipídico hepático circadiano (PubMed:30428350). Referencias relacionadas: PMID:30428350
• METTL3 metila los pri-ARNmi, marcándolos para el reconocimiento y procesamiento por DGCR8 (PubMed:25799998). Referencias relacionadas: PMID:25799998
• METTL3 cataliza la formación de m6A en el ARN Xist, promoviendo la represión transcripcional mediada por Xist durante la inactivación aleatoria del cromosoma X (PubMed:27602518). Referencias relacionadas: PMID:27602518
• METTL3 puede promover la traducción de ARNm independientemente de su actividad metiltransferasa al interactuar con factores de iniciación de la traducción en el citoplasma; su sobreexpresión está asociada a la proliferación de células cancerosas (PubMed:27117702). Referencias relacionadas: PMID:27117702
• Durante la infección por SARS-CoV-2, METTL3 añade modificaciones m6A al ARN viral, disminuyendo la unión a RIG-I y suprimiendo las respuestas inmunes innatas (PubMed:33961823). Referencias relacionadas: PMID:33961823
• Su localización subcelular es principalmente nuclear, está enriquecido en gránulos nucleares y también se detecta en el citoplasma. Se expresa ampliamente a niveles bajos, destacando en bazo, timo, próstata, testículo, ovario, intestino delgado, colon y leucocitos de sangre periférica. Es una fosfoproteína, está acetilada y sufre empalme alternativo.

Guía experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo se obtuvo contra los aminoácidos 2-250 de la METTL3 humana, correspondientes a la región N-terminal que contiene el dominio MT-A70. Se espera que detecte la METTL3 de longitud completa de ~64 kDa en ensayos WB.
• Para IF/ICC, se espera un patrón de tinción nuclear y en gránulos nucleares; se recomienda realizar una cotinción con marcadores nucleares.
• En experimentos de IP, confirme la especificidad incluyendo un control negativo de IgG y valide la coinmunoprecipitación de METTL14 si estudia el complejo.
• La reactividad cruzada con ratón y rata lo hace adecuado para estudios en modelos de roedores; no obstante, se recomienda realizar la validación en el tejido o línea celular correspondiente.
• Optimice la dilución del anticuerpo para cada aplicación; no se proporcionan diluciones iniciales típicas, por lo que se recomienda una titulación empírica.

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