Anticuerpo policlonal de conejo contra KMT2A para WB, IF/ICC, ELISA - Q03164

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de KMT2A

• KMT2A (MLL1, ALL-1, HRX) es la subunidad catalítica del complejo MLL1/MLL, una histona metiltransferasa que genera predominantemente marcas de H3K4me1 y H3K4me2 en regiones de cromatina activa, facilitando la transcripción y la reparación del ADN. Referencias relacionadas: PMID:12453419 PMID:15960975 PMID:19187761
• La enzima tiene una baja actividad metiltransferasa por sí sola y requiere el ensamblaje con otros miembros del complejo central (p. ej., WDR5, ASH2L, RBBP5) para lograr una competencia catalítica completa. Referencias relacionadas: PMID:19187761 PMID:26886794
• Se une a islas CpG no metiladas en los promotores de genes diana, manteniendo su estado hipometilado, y es fundamental para la activación transcripcional de HOXA9, un regulador clave del desarrollo. Referencias relacionadas: PMID:12453419 PMID:20010842 PMID:20677832
• KMT2A se localiza predominantemente en el núcleo.
• Se expresa en el corazón, pulmón, cerebro y linfocitos T y B, lo cual es consistente con sus funciones en el desarrollo y la hematopoyesis.
• Participa en el reloj circadiano mediando la metilación rítmica de H3K4, lo que establece un estado de cromatina permisivo para la unión de CLOCK-BMAL1 (por similitud).
• Sufre autometilación en Cys-3882, una modificación que puede modular su actividad enzimática. Referencias relacionadas: PMID:24235145
• KMT2A es un protooncogén frecuentemente involucrado en reordenamientos cromosómicos que producen proteínas de fusión oncogénicas, impulsando leucemias linfoblásticas y mieloides agudas.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 2829–2883 cerca del extremo C-terminal; tenga en cuenta que este anticuerpo policlonal puede reconocer la KMT2A de longitud completa (~432 kDa), así como ciertas isoformas o fragmentos proteolíticos.
• Para Western blot, utilice geles de SDS-PAGE de bajo porcentaje (p. ej., 6%), tiempos de transferencia húmeda prolongados e incluya inhibidores de proteasa en el tampón de lisis para preservar la proteína grande de 432 kDa.
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica, espere tinción nuclear; realice una co-tinción con un marcador nuclear (p. ej., DAPI) y valide la especificidad en controles de eliminación (knock-down o knockout).
• Para ELISA, se pueden emplear protocolos estándar indirectos o de tipo sándwich; titule el anticuerpo para determinar las concentraciones de trabajo óptimas para su sistema de ensayo específico.
• Se ha reportado reactividad cruzada con ortólogos de ratón y rata; sin embargo, verifique la homología de secuencia y la reactividad en los lisados de las especies relevantes antes de realizar experimentos a gran escala.

CamelBio: Su puente de abastecimiento integral

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