[KO Validado] Anticuerpo policlonal de conejo Anti-AIF para WB, IF, IHC, ELISA - O95831

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de AIF

• AIF, también conocido como proteína 8 de muerte celular programada (PDCD8), está codificado por el gen AIFM1 en humanos. Existen múltiples isoformas debido al splicing alternativo, que incluyen una isoforma proapoptótica y variantes específicas del cerebro.
• AIF funciona como NADH oxidorreductasa en el metabolismo mitocondrial normal y actúa como regulador clave de la apoptosis independiente de caspasas. Tras la estimulación apoptótica, se libera desde el espacio intermembranal mitocondrial hacia el citosol y el núcleo, donde desencadena la condensación de cromatina y la fragmentación a gran escala del ADN (partanatos). Referencias relacionadas: PMID:17094969 PMID:20362274 PMID:23217327
• En el núcleo, AIF se une al ADN de forma independiente de la secuencia e induce la fragmentación del ADN cromosómico independiente de caspasas, característica distintiva del partanatos. Referencias relacionadas: PMID:27178839 PMID:20362274
• AIF interactúa con EIF3G para inhibir la síntesis proteica al bloquear la maquinaria de traducción de EIF3 y activa la caspasa-7, amplificando de este modo la apoptosis. Referencias relacionadas: PMID:17094969
• AIF desempeña un papel fundamental en la muerte celular picnótica independiente de caspasas inducida por la exposición a peróxido de hidrógeno. Referencias relacionadas: PMID:19418225
• En la homeostasis mitocondrial, AIF participa en la biogénesis de la cadena respiratoria al interactuar con CHCHD4 y controlar su importación mitocondrial. Referencias relacionadas: PMID:26004228
• Bajo condiciones normales, AIF se localiza predominantemente en el espacio intermembranal mitocondrial y la membrana interna. Durante la apoptosis, se transloca al citoplasma, la región perinuclear y el núcleo.
• AIF se expresa en todos los tejidos humanos analizados excepto el cerebro (isoforma 5). Se detecta en músculo, fibroblastos de piel y osteoblastos. Es destacable que la isoforma 5 se encuentra frecuentemente regulada a la baja en diversos tipos de cáncer humano.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región C-terminal (aa 334-613) de la AIF humana, lo que puede permitir el reconocimiento de múltiples variantes de splicing. Para aplicaciones como Western blot (WB), se espera una banda alrededor de los 67 kDa. Se recomienda usar lisados validados con knockout (KO) para confirmar la especificidad.
• Para inmunofluorescencia (IF/ICC), tenga en cuenta que AIF se localiza predominantemente en las mitocondrias de células sanas, pero se transloca al núcleo tras la inducción de apoptosis. Las condiciones de fijación y permeabilización deben optimizarse para preservar la tinción tanto mitocondrial como nuclear.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), puede ser necesario realizar una recuperación de antígeno para desbloquear epítopos; pruebe protocolos estándar basados en citrato o EDTA. Valide el anticuerpo en tejidos de control positivo (por ejemplo, músculo, piel) que expresen AIF.
• Para ELISA, su naturaleza policlonal permite usarlo tanto como anticuerpo de captación como de detección en formatos sándwich, aunque el emparejamiento con un anticuerpo monoclonal puede reducir el fondo.

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