[Validado por KO] Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-AMPKα1 para WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q13131

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de AMPKα1

• Codificado por el gen PRKAA1, AMPKα1 (subunidad catalítica alfa-1 de la proteína quinasa activada por 5'-AMP) también se conoce como quinasa ACACA, quinasa HMGCR y quinasa de la proteína tau PRKAA1.
• Funciona como la subunidad catalítica de AMPK, un sensor clave de energía que activa las vías de producción de energía e inhibe los procesos que consumen energía en respuesta a niveles bajos de ATP intracelular.
  Referencias relacionadas:
  PMID:17307971
  PMID:17712357
  PMID:24563466
• Fosforila e inactiva directamente enzimas metabólicas involucradas en la síntesis de lípidos (p. ej., ACACA, ACACB, HMGCR, LIPE) y regula la síntesis de colesterol.
  Referencias relacionadas:
  PMID:34077757
• Modula la transcripción y la estructura de la cromatina fosforilando factores de transcripción e histonas, incluyendo la histona H2B en Ser-36, para reprogramar la expresión génica.
  Referencias relacionadas:
  PMID:11518699
  PMID:11554766
  PMID:15866171
• Regula negativamente la señalización mTORC1 y estimula la autofagia bajo limitación de nutrientes mediante la fosforilación de TSC2, RPTOR, WDR24 y ULK1.
  Referencias relacionadas:
  PMID:14651849
  PMID:18439900
  PMID:20160076
  PMID:21205641
  PMID:36732624
  PMID:37079666
• Se localiza en el citoplasma, el núcleo y los endosomas tardíos, lo cual es consistente con sus múltiples funciones en la señalización metabólica y el tráfico.
• Palabras clave: AMPKα1 es una quinasa de serina/treonina que se une a ATP y participa en la autofagia, el metabolismo de lípidos, la regulación de la cromatina, el control del ciclo celular y las interacciones huésped-virus.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 381-480, una región cercana al extremo C-terminal de AMPKα1 humano. Esto puede influir en la detección en mutantes de truncamiento o el reconocimiento específico de isoformas; validar en el sistema de muestra relevante.
• Para la transferencia Western (Western blotting, WB), el peso molecular predicho es de ~64 kDa. Use inhibidores frescos de proteasas/fosfatasas y considere controles de carga como β-actina.
• Los datos de validación por Knockout (KO) respaldan la especificidad en muestras humanas; se recomiendan lisados celulares KO como controles negativos.
• Para la inmunoprecipitación (IP), la preclearing de los lisados y el uso de un paso de centrifugación a baja velocidad pueden reducir la unión no específica.
• En inmunocitoquímica/inmunofluorescencia (IF/ICC), la fijación con PFA al 4% y la permeabilización con Triton X-100 al 0,1% son condiciones iniciales típicas.
• Las aplicaciones ELISA, IHC-P e IF/ICC pueden requerir recuperación de antígenos o optimización del recubrimiento de proteínas; titule el anticuerpo primario para obtener una relación señal/ruido óptima.
• Se indica reactividad cruzada con AMPKα1 de ratón y rata; sin embargo, se aconseja la alineación de secuencias de la región del inmunógeno para confirmar la consistencia entre especies.

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