[KO Validado] Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-CD133 para WB, IF/ICC, IP, ELISA - O43490

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Prominina-1

• La Prominina-1 (también conocida como AC133, CD133) es una glicoproteína transmembrana codificada por el gen PROM1; el empalme alternativo genera múltiples isoformas con distribuciones tisulares distintas.
• Está involucrada en la diferenciación, proliferación y apoptosis celular. Referencias relacionadas: PMID:24556617
• La proteína se une al colesterol en microdominios de la membrana plasmática y contribuye a la organización de la membrana plasmática apical en células epiteliales.
• Durante el desarrollo retinal temprano, la prominina-1 actúa como un regulador clave de la morfogénesis del disco, subrayando su importancia en la estructura de los fotorreceptores.
• En células de neuroblastoma, suprime la diferenciación neuronal (crecimiento de neuritas) de manera dependiente de RET. Referencias relacionadas: PMID:20818439
• La localización subcelular incluye la membrana celular apical, microvellosidades, cilios, segmentos externos de los fotorreceptores y el compartimento intermedio retículo endoplásmico–Golgi.
• La isoforma 1 es un marcador bien establecido para células madre y progenitoras hematopoyéticas CD34+, mientras que la isoforma 2 muestra expresión predominante en hígado fetal, músculo esquelético, riñón, corazón, y en páncreas, riñón, hígado, pulmón y placenta adultos.
• Se han identificado modificaciones postraduccionales como acetilación, fosforilación y glicosilación, que pueden influir en su función y peso molecular en los ensayos.
• Las mutaciones en PROM1 se asocian con distrofias retinianas hereditarias, incluyendo distrofia de conos y bastones, retinitis pigmentosa y enfermedad de Stargardt.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno (aa 179–433) se dirige al dominio extracelular, probablemente beneficioso para el marcado de superficie en IF/ICC; asegure condiciones óptimas de fijación y permeabilización para estudios de localización celular.
• Para western blot, tenga en cuenta que CD133 está altamente glicosilada; la masa teórica es de ~97 kDa, pero la banda observada puede migrar más alta. Use condiciones reductoras/desnaturalizantes y valide con un control positivo (por ejemplo, células madre) junto con la estrategia de control negativo validada por KO proporcionada.
• Al realizar inmunoprecipitación, se recomiendan tampones de lisis suaves que preserven la integridad de las proteínas de membrana, y la concentración de anticuerpo debe optimizarse para cada sistema experimental.
• Para ELISA, el anticuerpo puede evaluarse como reactivo de captura o detección; considere emparejarlo con un anticuerpo de detección coincidente y validar con proteína CD133 recombinante.
• Al ser un anticuerpo policlonal de conejo, es posible una variabilidad entre lotes; es una buena práctica titular cada lote nuevo para la aplicación prevista y confirmar la especificidad en la matriz de muestra relevante.

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