[Validado KO] Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CDKN1A/p21 para WB, IHC-P, ELISA - P38936

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CDKN1A/p21

• CDKN1A/p21, también conocido como CIP1, WAF1, SDI1, MDA-6 y CAP20, es un inhibidor clave de las quinasas dependientes de ciclinas involucrado en la regulación del ciclo celular.
• Desempeña un papel crítico en el control de la progresión del ciclo celular y en la detención en G2 inducida por daño en el ADN, mediando la inhibición de la proliferación dependiente de p53/TP53 e independiente (vía CREB3L1). Referencias relacionadas: PMID:9106657
• CDKN1A se une e inhibe la actividad de las quinasas dependientes de ciclinas, impidiendo la fosforilación de sustratos críticos para bloquear la progresión del ciclo celular. También modula el ensamblaje y la actividad quinasa del complejo ciclina D-CDK4 de manera dependiente de la dosis.
• La proteína inhibe la síntesis de ADN al competir con POLD3 por la unión a PCNA, interrumpiendo la función de la ADN polimerasa delta. Referencias relacionadas: PMID:11595739
• En los queratinocitos, regula negativamente la fosforilación de RB1 impulsada por CDK4/6, lo que lleva a la liberación de E2F1 y la transcripción de genes de la fase G1/S.
• Localizado tanto en el núcleo como en el citoplasma, CDKN1A se expresa de manera ubicua en tejidos adultos, con niveles notablemente más bajos en el cerebro.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación, acetilación y ubiquitinación, y presenta un dominio de dedo de zinc para la unión de metales.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno abarca la región N-terminal (aa 1-164), que contiene los dominios de unión a CDK y PCNA, lo que convierte a este anticuerpo en un candidato para detectar interacciones funcionales.
• Para WB, considere que p21 migra alrededor de 18-21 kDa; se recomiendan controles de carga como GAPDH o β-actina.
• Valide la reactividad en muestras de ratón y rata, ya que se informa reactividad cruzada; confirme la especificidad de la banda en la especie de interés.
• Para IHC-P, optimice la recuperación antigénica y la dilución del anticuerpo; se puede observar tinción tanto nuclear como citoplasmática.
• Las aplicaciones de ELISA pueden requerir la titulación del anticuerpo y el antígeno para lograr una relación señal-ruido óptima.

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