[Validado por KO] Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-CDKN2A/p16INK4a para WB, IF/ICC, ELISA - P42771 / Q8N726

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CDKN2A/p16INK4a

• CDKN2A codifica el inhibidor 2A de la quinasa dependiente de ciclina, también conocido como p16INK4a, supresor tumoral múltiple 1 (MTS-1) y CDK4I. Funciona como un regulador negativo de la progresión del ciclo celular al inhibir CDK4 y CDK6, evitando la fosforilación de la proteína del retinoblastoma.
• La proteína se localiza tanto en el citoplasma como en el núcleo, consistente con su papel en el control de la entrada al ciclo celular.
• CDKN2A se expresa ampliamente en tejidos normales, con excepciones que incluyen cerebro y músculo esquelético. La isoforma 3 muestra expresión específica del páncreas.
• p16INK4a es un supresor tumoral frecuentemente mutado o delecionado en varios cánceres, incluido el síndrome de Li-Fraumeni, subrayando su papel crítico en el mantenimiento de la estabilidad genómica.
• La proteína sufre modificaciones postraduccionales como acetilación y fosforilación, que pueden regular su actividad y estabilidad.
• p16INK4a contiene motivos de repetición ANK, facilitando interacciones proteína-proteína esenciales para su función inhibitoria sobre CDK4/6.
• Estudios funcionales demuestran que la inducción de p16INK4a conduce a la detención del ciclo celular en la fase G1, destacando su importancia en la senescencia y la supresión tumoral.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético correspondiente a los aminoácidos 1–156 de p16INK4a humano (NP_000068.1). Para Western blotting, considere usar lisados celulares completos de líneas celulares humanas conocidas por expresar CDKN2A. Dado que el producto está validado por KO, se recomienda incluir un lisado control de knockout de CDKN2A para confirmar la especificidad de la banda.
• El peso molecular predicho de p16INK4a es aproximadamente 16 kDa, aunque pueden detectarse múltiples isoformas (8–17 kDa) debido a empalme alternativo y modificaciones postraduccionales. Optimice el porcentaje de gel y las condiciones de transferencia para proteínas de bajo peso molecular.
• Para inmunofluorescencia (IF/ICC), se aconseja una fijación adecuada (por ejemplo, paraformaldehído al 4%) y permeabilización (por ejemplo, Tritón X-100 al 0.1%). p16INK4a se localiza tanto en el núcleo como en el citoplasma, por lo que la imagen debe cubrir toda la célula.
• En aplicaciones de ELISA, el anticuerpo puede usarse como reactivo de captura o detección después de la validación contra el antígeno diana. Asegure un tampón de recubrimiento y pasos de bloqueo adecuados para una señal óptima.

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