[Validado por KO] Anticuerpo monoclonal de conejo anti-KEAP1 (INrf2/KLHL19) - Q14145

Especificaciones y parámetros principales del producto

Contexto biológico: función y localización de KEAP1

• KEAP1 (proteína 1 asociada a ECH tipo Kelch), también conocida como INrf2 o KLHL19, es un adaptador específico de sustrato para el complejo de ligasa E3 de ubiquitina BCR (BTB-CUL3-RBX1).
• Regula la respuesta al estrés oxidativo al dirigir el factor de transcripción NFE2L2/NRF2 hacia la ubiquitinación y degradación proteasómica en condiciones normales. Referencias relacionadas: PMID:14585973 PMID:15379550 PMID:15572695
• El estrés oxidativo o electrofílico desencadena la modificación covalente de residuos de cisteína reactivos en KEAP1, inactivando la ligasa y permitiendo que NRF2 se acumule y active genes citoprotectores. Referencias relacionadas: PMID:16006525 PMID:17127771 PMID:18251510
• KEAP1 también media la ubiquitinación de sustratos como SQSTM1/p62, BPTF y PGAM5, y participa en vías de autofagia selectiva. Referencias relacionadas: PMID:15379550 PMID:17046835 PMID:20452972 PMID:28380357
• Se localiza tanto en el citoplasma como en el núcleo.
• Se expresa ampliamente, con los niveles más altos en el músculo esquelético.
• Contiene repeticiones Kelch y un dominio BTB; se clasifica en las vías de interacción hospedador-virus, S-nitrosilación y conjugación de Ubl.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región C-terminal (aa 525-624) de KEAP1 humano, que incluye dominios de repetición Kelch críticos para la unión al sustrato. Esta región está bien conservada, lo que respalda la reactividad cruzada con ratón y rata.
• Para la transferencia Western, se espera una banda de aproximadamente 70 kDa. Tenga en cuenta que las modificaciones postraduccionales (por ejemplo, la ubiquitinación) o las modificaciones oxidativas pueden alterar ligeramente la migración.
• Para IF/ICC, puede observarse tinción tanto citoplasmática como nuclear, dependiendo de las condiciones de estrés celular.
• El anticuerpo ha sido validado por KO, lo que confirma su especificidad; sin embargo, valide siempre el anticuerpo en su sistema de muestras específico e incluya los controles adecuados.
• Para ELISA, debe confirmarse la unión directa al péptido inmunógeno; el emparejamiento con un anticuerpo de captura puede requerir optimización.

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