[KO Validado] Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-LDHA para WB, IF/ICC, ELISA - P00338

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de LDHA

• LDHA (cadena A de la L-lactato deshidrogenasa) es una enzima glucolítica clave que cataliza la interconversión estereoespecífica de piruvato y lactato, acoplada al recambio de NADH/NAD+.
• También conocida como subunidad muscular de LDH (LDH-M), se expresa predominantemente en tejidos anaeróbicos como el músculo esquelético y el hígado, donde se requiere un alto flujo glucolítico.
• Se localiza en el citoplasma, acorde con su función en el metabolismo citosólico.
• Sufre múltiples modificaciones postraduccionales, incluyendo acetilación, fosforilación y ubiquitinación, que pueden regular su actividad, estabilidad o proteínas interactuantes.
• El empalme alternativo produce múltiples isoformas, aunque sus diferencias funcionales aún no se han caracterizado completamente.
• Las mutaciones en LDHA se asocian con la enfermedad por almacenamiento de glucógeno tipo XI (GSD11), lo que subraya su papel crítico en el metabolismo energético.
• La proteína tiene un peso molecular de aproximadamente 36.7 kDa (UniProt: 36689 Da), pero el anticuerpo detecta una banda entre 26-39 kDa, probablemente debido a variaciones de isoforma o PTMs.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El anticuerpo se generó contra un péptido sintético correspondiente a los aminoácidos 200-300 de LDHA humana. Esta región está conservada en humanos, ratones y ratas, lo que explica la amplia reactividad cruzada.
• Las aplicaciones recomendadas incluyen Western blot (WB), inmunofluorescencia/ICC (IF/ICC) y ELISA. Para WB, la banda detectada puede aparecer entre 26–39 kDa; considerando el peso molecular predicho de ~36.7 kDa, valide la especificidad de la banda en su sistema de muestra.
• Considere usar lisados de tejido o células apropiados que expresen LDHA, como músculo esquelético o hígado, para controles positivos.
• Para inmunofluorescencia, se requiere permeabilización ya que LDHA es citoplasmática. Valide el patrón de tinción en líneas celulares relevantes.

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