[KO Validado] Anticuerpo policlonal de conejo Anti-NSDHL para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q15738

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de NSDHL

• NSDHL (esterol-4-alfa-carboxilato 3-deshidrogenasa, descarboxilante), también denominado H105E3, XAP104, SDR31E1 o HL, es una enzima codificada por el gen NSDHL en humanos.
• Cataliza la descarboxilación oxidativa dependiente de NAD(P)+ de los grupos metilo C4 de los 4-alfa-carboxiesteroles, un paso crítico en la biosíntesis del colesterol posterior al escualeno (Por similitud).
• Además, NSDHL contribuye a la regulación del tráfico endocítico del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR) (Por similitud).
• La proteína pertenece a la familia de 3-beta-hidroxiesteroide deshidrogenasa/isomerasa y posee dominios de deshidrogenasa/reductasa de cadena corta (SDR); se clasifica como una oxidoreductasa que utiliza NAD como cofactor.
• A nivel subcelular, NSDHL se localiza en la membrana del retículo endoplásmico y en gotas lipídicas, lo que coincide con su papel central en el metabolismo de los esteroles.
• Presenta una expresión tisular amplia, y se ha detectado en cerebro, corazón, hígado, pulmón, riñón, piel y placenta.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación y fosforilación, que pueden modular la actividad enzimática o las interacciones.
• Las mutaciones en NSDHL están asociadas al síndrome CHILD (hemidisplasia congénita con eritrodermia ictiosiforme y defectos de extremidades) y discapacidad intelectual ligada al X, lo que subraya su importancia en los trastornos del desarrollo relacionados con lípidos.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 1–240 de NSDHL humano, una región que contiene dominios catalíticos conservados; este diseño puede garantizar un reconocimiento amplio entre especies, pero confirma siempre la homología de secuencia si trabajas con organismos no listados.
• Para Western blotting, considera usar un control positivo como lisado de HeLa, HepG2 o tejido de hígado de ratón; el peso molecular predicho es de aproximadamente 42 kDa, aunque las modificaciones postraduccionales pueden causar ligeros desplazamientos.
• En inmunohistoquímica (secciones de parafina) e inmunofluorescencia, valida el anticuerpo en tejidos que se sabe expresan NSDHL (por ejemplo, piel y placenta) y optimiza las condiciones de recuperación de antígeno.
• Debido a la naturaleza policlonal, el fondo puede variar entre lotes; se recomienda la inclusión de controles negativos apropiados (lisados KO o péptidos de bloqueo) para evaluar la especificidad.
• Para aplicaciones de ELISA, el emparejamiento de este anticuerpo con un anticuerpo de captura dirigido a un epitopo distinto de NSDHL puede aumentar la sensibilidad del ensayo; se aconseja una titulación preliminar.

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