[Validado por KO] Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-PML para WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P29590

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de PML

• La proteína PML, también conocida como TRIM19, es miembro de la familia de motivo tripartito (TRIM) y funciona como una ligasa E3 de proteínas SUMO, desempeñando un papel central en el ensamblaje de los cuerpos nucleares PML (PML-NBs) y mediando la sumoilación de proteínas diana.
• PML inhibe la exportación nuclear de ARNm mediada por EIF4E al reducir la afinidad de EIF4E por la capucha 5' m7G, contribuyendo a su función supresora de tumores. Referencias relacionadas: PMID:11500381 PMID:11575918 PMID:18391071
• El empalme alternativo genera múltiples isoformas (p. ej., PML-1 a PML-14), que exhiben localizaciones subcelulares distintas y especializaciones funcionales; las isoformas nucleares están involucradas en la remodelación de la cromatina y la regulación génica, mientras que las isoformas citoplasmáticas median la señalización de TGF-beta y restringen la replicación viral.
• PML se localiza predominantemente en el núcleo donde forma PML-NBs, pero también se puede encontrar en el nucleoplasma, citoplasma, membrana del retículo endoplásmico y membrana del endosoma temprano, dependiendo de la isoforma y el contexto celular.
• Modificaciones postraduccionales como la sumoilación, acetilación y fosforilación son críticas para la dinámica de los PML-NB y las interacciones funcionales de PML, influyendo en su papel en la apoptosis, el ritmo circadiano y las respuestas antivirales.
• PML actúa como una ligasa E3 de proteínas SUMO, sumoilando sustratos virales y celulares para regular la inmunidad innata antiviral. Referencias relacionadas: PMID:20972456 PMID:28250117
• PML exhibe una amplia actividad antiviral contra virus de ADN y ARN, incluidos el virus del herpes simple, influenza A, rabia y hepatitis C, a menudo secuestrando proteínas virales dentro de los PML-NBs e inhibiendo la replicación viral.
• Como supresor tumoral, PML regula vías de señalización clave al modular la actividad de p53, RB1, AKT, PTEN y mTOR, contribuyendo a la supresión del crecimiento y la senescencia.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 1-185 de PML humana, cubriendo la región N-terminal que incluye los dominios dedo de zinc RING y B-box; considere esto al diseñar experimentos para detectar isoformas específicas.
• Para Western blot, se espera una banda de ~98 kDa; sin embargo, debido a múltiples isoformas y sumoilación, se pueden observar bandas adicionales. Valide con controles apropiados, especialmente cuando utilice líneas celulares knockout.
• En inmunofluorescencia, PML típicamente muestra un patrón de tinción nuclear punteado característico de los cuerpos nucleares PML; la co-localización con marcadores como SP100 puede confirmar la especificidad.
• Para inmunohistoquímica, valide en muestras de tejido humano y optimice las condiciones de recuperación de antígeno para garantizar una tinción nuclear robusta. Tenga en cuenta que la expresión de PML puede ser baja en algunos tejidos normales.
• Este anticuerpo ha sido validado para estudios de knockout; incluya controles de knockout apropiados para confirmar la especificidad en su sistema de muestra.
• Cuando se utilice para inmunoprecipitación o ELISA, considere la reactividad del anticuerpo con PML desnaturalizada vs. nativa y los posibles epítopos conformacionales dependientes de SUMO.

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