[KO Validated] Anticuerpo policlonal de conejo anti-PML para WB, IHC-P, ELISA - P29590

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de PML

• Codificada por el gen PML, la proteína PML también se conoce como ligasa E3 de SUMO-proteínas PML, proteína de la leucemia promielocítica, proteína 71 con dominio de dedo RING y proteína 19 con motivo tripartito (TRIM19). Pertenece a la familia TRIM y contiene un dominio de dedo RING, una caja B, una región de hélice enrollada y un dominio C-terminal sujeto a corte y empalme alternativo, lo que genera múltiples isoformas con funciones distintas.
• Actúa como la proteína estructural esencial de los cuerpos nucleares de PML (PML-NB), estructuras subnucleares dinámicas que regulan la supresión tumoral, el control transcripcional, la apoptosis, la senescencia, las respuestas al daño del ADN y la defensa antiviral mediante el reclutamiento y la modulación de numerosas proteínas asociadas a través de interacciones mediadas por SUMO.
• Inhibe la exportación nuclear de ARNm mediada por EIF4E al reducir la afinidad de unión de EIF4E a la caperuza 5' m7G de los ARNm diana, controlando así la expresión génica a nivel postranscripcional. Referencias relacionadas: PMID:11500381 PMID:11575918 PMID:18391071
• Funciona como una ligasa E3 de SUMO-proteínas que cataliza la conjugación de SUMO a proteínas sustrato, incluidas las proteínas virales inmediatas tempranas, y presenta una sólida actividad de sumoilación dependiente de la isoforma, particularmente en las isoformas PML-3 y PML-6. Referencias relacionadas: PMID:20972456 PMID:28250117
• Múltiples isoformas (PML-1 a PML-14) presentan localizaciones subcelulares distintas: las isoformas nucleares (por ejemplo, PML-4) se localizan en los PML-NB y el nucleoplasma, mientras que las isoformas citoplasmáticas (por ejemplo, PML-14) se asocian con el retículo endoplásmico y las membranas de los endosomas tempranos, permitiendo una señalización dependiente del contexto en TGF-beta y otras vías.
• Las modificaciones postraduccionales principales incluyen la SUMOilación (esencial para la formación de los PML-NB), la fosforilación y la acetilación, que modulan su estabilidad, sus interacciones y sus funciones supresoras de tumores.
• Presenta una amplia actividad antiviral contra virus de ADN y ARN (por ejemplo, herpesvirus, virus de la rabia, virus de la influenza y HCV) mediante mecanismos específicos de cada isoforma, como el secuestro de cápsides virales, la inhibición de la síntesis de ARNm y proteínas virales y la inducción de la apoptosis en células infectadas.
• Desempeña un papel fundamental en la senescencia celular y la apoptosis al regular positivamente la estabilidad y la actividad de p53/TP53, y al reprimir la transcripción de TBX2 mediante el complejo RBL2/E2F4, vinculando PML con la detención permanente del crecimiento.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 300-600 de la PML humana (isoforma 1), una región central que se espera que detecte múltiples isoformas; considere verificar la reactividad en su sistema modelo específico debido al corte y empalme alternativo.
• Para Western blot, el peso molecular previsto es de aproximadamente 98 kDa, pero las isoformas y las especies sumoiladas pueden aparecer con pesos moleculares superiores; se recomienda utilizar un marcador de proteínas de alta calidad y optimizar las condiciones de transferencia.
• Este anticuerpo está validado para la confirmación mediante KO (knockout); asegúrese de incluir lisados de control KO adecuados en los experimentos de WB para confirmar la especificidad de la banda.
• Para IHC-P, deben optimizarse las condiciones de recuperación antigénica (por ejemplo, tampón de citrato a pH 6,0 o EDTA a pH 9,0), y es aconsejable validar los patrones de tinción comparándolos con la distribución conocida de los PML-NB en los tejidos.
• En aplicaciones de ELISA, considere utilizar el inmunógeno recombinante como control positivo para establecer la sensibilidad y el intervalo lineal.

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