[KO Validado] Anticuerpo policlonal de conejo anti-RELA para WB, ELISA - Q04207

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de RELA

• RELA, también conocido como factor de transcripción p65 o subunidad p65 del factor nuclear NF-kappa-B, es miembro de la familia de proteínas NF-kB/Rel.
• NF-kB es un factor de transcripción pleiotrópico que regula procesos biológicos como la inflamación, la inmunidad, la diferenciación, el crecimiento celular, la tumorogénesis y la apoptosis.
• RELA forma homodímeros o heterodímeros con otras proteínas que contienen dominios similares a Rel; el heterodímero RELA-NFKB1 es el más abundante y funciona como activador transcripcional.
• Los dímeros de NF-kB se retienen en el citoplasma en un estado inactivo al unirse a los inhibidores IkB; tras la estimulación, IkB se fosforila y degrada, lo que permite la translocación de NF-kB al núcleo.
• La localización subcelular es dinámica: predominantemente citoplasmática en células en reposo y nuclear tras la activación; se desplaza entre el núcleo y el citoplasma.
• Las modificaciones postraduccionales, incluidas la acetilación, la fosforilación y la metilación, modulan su actividad transcripcional y sus interacciones.
• RELA también puede modular la accesibilidad de los promotores para los factores de transcripción, regulando indirectamente la expresión génica (PubMed:29813070). Referencias relacionadas: PMID:29813070
• A nivel proteico, RELA se expresa, entre otros tejidos, en el miocardio.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es una proteína recombinante que cubre RELA de ratón; el anticuerpo es policlonal y ha sido validado mediante knockout (KO).
• Para Western blot, se espera una banda de aproximadamente 60 kDa. Utilice controles positivos adecuados, como lisados de tejidos de ratón conocidos por expresar RELA, y valide la especificidad en su sistema de muestras.
• Para ELISA, considere realizar una titulación en tablero de ajedrez para optimizar las concentraciones de los anticuerpos de recubrimiento y detección; la reactividad cruzada con humano permite su posible uso en muestras humanas tras la validación.
• Debido a la regulación dinámica de RELA, considere utilizar tanto la fraccionación citoplasmática como la nuclear para evaluar el estado de activación.
• Incluya siempre controles negativos, como líneas celulares o tejidos knockout, para confirmar la especificidad.

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