[Validado KO] Anticuerpo monoclonal de conejo anti-Smad3 para WB, IHC-P, IP, ChIP, ELISA - P84022

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de Smad3

• Miembro 3 de la familia SMAD (SMAD3), también conocido como homólogo 3 de Mothers against decapentaplegic (MADH3) o hMAD-3, está codificado por el gen SMAD3 y funciona como un SMAD regulado por receptor (R-SMAD) en la vía de señalización de TGF-beta.
• Actúa como transductor de señal intracelular y modulador transcripcional: tras su activación por quinasas del receptor tipo 1 de TGF-beta o activina, forma un complejo con SMAD4 y se transloca al núcleo para regular la transcripción de genes diana.
• Se une al elemento TRE en los promotores de genes que responden a TGF-beta y puede formar un complejo SMAD3/SMAD4/JUN/FOS en los sitios AP-1/SMAD para ajustar con precisión la transcripción.
• Se transloca entre el citoplasma y el núcleo; es predominantemente citoplasmático en ausencia de ligando y se acumula en el núcleo tras la activación de la vía (PMID: no disponible).
• Regula la condrogénesis y la osteogénesis, inhibe la curación temprana de fracturas óseas y modula la cicatrización de heridas al afectar el crecimiento/migración de queratinocitos y la quimiotaxis de monocitos de una forma sensible a hormonas.
• Está sujeto a múltiples modificaciones postraduccionales, entre ellas fosforilación, acetilación, ADP-ribosilación y ubiquitinación, que controlan su actividad, estabilidad e interacciones; además contiene dominios de unión a zinc esenciales para la unión al ADN.
• Se producen múltiples isoformas por empalme alternativo, lo que contribuye a la diversidad funcional.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético que abarca los aminoácidos 100-200 de Smad3 humano (NP_005893.1). Esta región está conservada, lo que explica la reactividad cruzada del anticuerpo con Smad3 de ratón y rata.
• Para Western blot (WB), se espera una banda de aproximadamente 48 kDa. Incluya controles de carga adecuados y marcadores de peso molecular para confirmar el tamaño de la banda.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P), las condiciones de recuperación de antígeno (por ejemplo, recuperación de epítopes inducida por calor) pueden requerir optimización según el tipo de tejido y el método de fijación.
• El anticuerpo ha sido validado para inmunoprecipitación de cromatina (ChIP); se recomienda usar loci de control positivo y negativo para la unión de Smad3 para garantizar la especificidad.
• También es apto para inmunoprecipitación (IP) y ELISA. Los usuarios finales deben titular el anticuerpo para determinar la dilución óptima para sus sistemas experimentales específicos.

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