[Validado KO] Anticuerpo policlonal de conejo ERK2 para WB, IF/ICC y ELISA - P28482

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de ERK2

• ERK2, codificado por el gen MAPK1, también se conoce como proteína quinasa activada por mitógenos 1, quinasa regulada por señales extracelulares 2, isoforma p42 de MAP quinasa y MAPK2. Es una serina/treonina quinasa esencial para la cascada de transducción de señales MAPK/ERK, que funciona junto a ERK1 (MAPK3) en respuesta a diversos estímulos.
• ERK2 media una amplia gama de procesos celulares, como crecimiento celular, adhesión, supervivencia, diferenciación, regulación de la transcripción, traducción, reorganización del citoesqueleto y apoptosis, mediante la fosforilación de más de 160 sustratos identificados. Estos sustratos incluyen factores de transcripción (por ejemplo, ATF2, ELK1, FOS), elementos del citoesqueleto, reguladores de la apoptosis y reguladores de la traducción. Referencias relacionadas: PMID:35831023
• Más allá de su actividad quinasa, ERK2 actúa como represor transcripcional que se une a la secuencia de ADN consenso [GC]AAA[GC], reprimiendo genes inducidos por interferón gamma como CCL5, IRF7 y STAT1. Esta función represora es independiente de su actividad quinasa.
• A nivel subcelular, ERK2 se localiza en el citoplasma, el citoesqueleto (incluyendo el huso mitótico, el centro organizador de microtúbulos y el centrosoma), el núcleo, las caveolas de la membrana y las adhesiones focales, lo que refleja su participación en procesos celulares dinámicos.
• ERK2 sufre múltiples modificaciones postraduccionales, entre ellas fosforilación (fundamental para su activación), acetilación y conjugación ubiquitin-like, que regulan su actividad, estabilidad y localización subcelular.
• La quinasa fosforila específicamente PGK1 en condiciones de hipoxia, dirigiéndola a las mitocondrias y suprimiendo la formación de acetil-CoA a partir del piruvato. Referencias relacionadas: PMID:26942675

Orientación experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo policlonal de conejo se obtuvo contra un péptido sintético que abarca los aminoácidos 200–300 de ERK2 humano (NP_002736.3). Se recomienda a los investigadores verificar la reactividad en su sistema de muestra específico, especialmente cuando se utilizan modelos distintos a humano, ratón o rata.
• Para aplicaciones de Western blot (WB), se recomienda usar controles positivos y negativos adecuados, incluidos lisados validados por knockout, para confirmar la especificidad de la banda en el peso molecular esperado (~41 kDa).
• En experimentos de inmunofluorescencia/ICC, se deben optimizar las condiciones de fijación y permeabilización, ya que ERK2 se traslada entre el citoplasma y el núcleo según el estado de estimulación; el uso de ayuno sérico y estimulación con factores de crecimiento puede ayudar a visualizar la localización dependiente de la activación.
• Para ELISA, la combinación con un anticuerpo de captura/detección adecuado puede aumentar la sensibilidad; se recomienda a los usuarios optimizar las condiciones de recubrimiento y bloqueo para su analito objetivo.
• Como reactivo policlonal, se debe monitorear la consistencia entre lotes; se sugieren medidas rutinarias de control de calidad para estudios a largo plazo.

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