[Validado por KO] pAb de conejo anti-HK1 para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P19367

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la Hexoquinasa-1 (HK1)

• La HK1 (Hexoquinasa-1) es una enzima de ~102 kDa que cataliza la fosforilación de hexosas, principalmente D-glucosa a glucosa-6-fosfato, el primer paso y limitante de la velocidad de la glucólisis (PubMed:1637300, PubMed:25316723, PubMed:27374331). Referencias relacionadas: PMID:1637300 PMID:25316723 PMID:27374331
• La enzima también fosforila otras hexosas como D-glucosamina, D-fructosa, D-manosa y 2-desoxi-D-glucosa, pero no N-acetil-D-glucosamina (PubMed:27374331). Referencias relacionadas: PMID:27374331
• Más allá de la glucólisis, la HK1 funciona como un receptor de reconocimiento de patrones para el peptidoglucano bacteriano, vinculando el metabolismo de la glucosa con la activación inmune innata. Cuando se libera N-acetil-D-glucosamina bacteriana en el citosol, inhibe la HK1 y promueve su disociación de la membrana mitocondrial externa, desencadenando la activación del inflamasoma NLRP3 (PubMed:27374331). Referencias relacionadas: PMID:27374331
• La HK1 se localiza predominantemente en la membrana mitocondrial externa, pero también se encuentra en el citosol, donde sus funciones metabólicas e inmunes se compartmentalizan.
• Existen múltiples isoformas específicas de tejido: la isoforma 2 es específica de eritrocitos, mientras que las isoformas 3 y 4 son específicas de testículo (PubMed:10978502). Referencias relacionadas: PMID:10978502
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación y fosforilación, que pueden regular la actividad enzimática y la localización subcelular.
• Las variantes genéticas en HK1 se asocian con enfermedades como la enfermedad de Charcot-Marie-Tooth, anemia hemolítica hereditaria, discapacidad intelectual, neurodegeneración, neuropatía y retinitis pigmentosa.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para Western blot, espere una banda a ~102 kDa. Considere el uso de condiciones reductoras y un tiempo de transferencia suficiente debido al gran tamaño de la proteína.
• El inmunógeno corresponde a la región N-terminal (aa 21–219), que es conservada entre humano, ratón y rata, lo que respalda una amplia reactividad cruzada entre especies.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P) e inmunofluorescencia (IF/ICC), tenga en cuenta que la HK1 es predominantemente mitocondrial; se deben esperar patrones de tinción mitocondrial. Puede ser necesaria la recuperación de antígeno y la permeabilización.
• Para inmunoprecipitación (IP), valide la unión del anticuerpo en condiciones nativas e incluya los controles de isotipo apropiados.
• El anticuerpo ha sido validado por knockout; sin embargo, incluya siempre controles positivos y negativos en su sistema experimental para confirmar la especificidad.

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