[Validado por KO] mAb de conejo contra IRF3 - Q14653

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de IRF3

• IRF3 es un regulador transcripcional clave de las respuestas inmunitarias dependientes del interferón (IFN) de tipo I y desempeña un papel fundamental en la inmunidad innata contra virus de ADN y ARN. Regula la transcripción de los genes de IFN de tipo I (IFN-alfa e IFN-beta) y de los genes estimulados por IFN (ISG) mediante su unión a los elementos de respuesta estimulados por interferón (ISRE) en sus promotores. Referencias relacionadas: PMID:22394562 PMID:24049179 PMID:25636800 PMID:11846977 PMID:16846591 PMID:16979567
• En las células no infectadas, IRF3 se encuentra en el citoplasma en una forma inactiva. Tras una infección viral, la presencia de ARN bicatenario (dsRNA) o la señalización de los receptores tipo Toll (TLR), es fosforilado por las quinasas IKBKE y TBK1, lo que induce un cambio conformacional que conduce a su dimerización, localización nuclear y asociación con CREBBP para formar el complejo factor 1 activado por dsRNA (DRAF1), que activa los genes de IFN de tipo I e ISG. Referencias relacionadas: PMID:22394562 PMID:25636800 PMID:27302953 PMID:16154084 PMID:33440148
• IRF3 puede activar programas diferenciados de expresión génica en los macrófagos e inducir una apoptosis significativa en macrófagos primarios. En respuesta a la infección por el virus Sendai, TOMM70:HSP90AA1 recluta IRF3 a las mitocondrias, donde forma el complejo apoptótico TOMM70:HSP90AA1:IRF3:BAX, induciendo la apoptosis. Referencias relacionadas: PMID:16846591 PMID:25609812
• IRF3 es un factor de transcripción clave que regula la respuesta al IFN durante la infección por SARS-CoV-2. Referencias relacionadas: PMID:33440148
• La localización subcelular incluye el citoplasma, el núcleo y las mitocondrias, en consonancia con su regulación dinámica durante la señalización.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación (fundamental para la activación), acetilación, formación de enlaces disulfuro, enlaces isopeptídicos y conjugación de Ubl.
• Se expresa de forma constitutiva en diversos tejidos, lo que pone de manifiesto su amplio papel en la defensa antiviral.
• El splicing alternativo produce múltiples isoformas, lo que potencialmente modula su función en diferentes contextos.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 1-260 de IRF3 humano (NP_001184051.1) y cubre la región N-terminal, que incluye los dominios de unión al ADN y de regulación. Este diseño puede detectar tanto las formas no fosforiladas como las fosforiladas, por lo que es adecuado para monitorizar los niveles totales de IRF3.
• Para el análisis mediante Western blot, considere utilizar lisados de células estimuladas con imitadores virales (por ejemplo, poly(I:C)) o interferones para observar cambios en la movilidad de las bandas dependientes de la activación, indicativos de fosforilación. Valide el análisis en el sistema de muestras correspondiente, como células infectadas por virus o activadas mediante TLR.
• En inmunohistoquímica e inmunofluorescencia, deben optimizarse la recuperación antigénica y los métodos de fijación adecuados para preservar la conformación nativa de IRF3, especialmente debido a que experimenta una translocación nuclear dependiente de la fosforilación.
• Para la inmunoprecipitación, asegúrese de utilizar condiciones de lisis suaves para mantener las interacciones proteína-proteína, ya que IRF3 forma complejos con socios como CREBBP y TBK1.
• La reactividad del anticuerpo con las especies de ratón y rata (basada en la homología de secuencia) permite realizar estudios entre especies, pero se recomienda verificar la reactividad en el modelo experimental específico.

CamelBio: su puente integral de aprovisionamiento

CamelBio proporciona a los fabricantes de diagnóstico, laboratorios e institutos de investigación acceso integral a materias primas para IVD, servicios técnicos y consultoría, cubriendo todas las etapas, desde el concepto hasta la clínica. Como socio de confianza en la investigación de inmuno-oncología y enfermedades infecciosas, ofrecemos pares de anticuerpos validados, anticuerpos monoclonales y policlonales optimizados, reactivos auxiliares a granel y apoyo para el aprovisionamiento de materias primas dirigidas a dianas poco frecuentes. Con este anticuerpo monoclonal contra IRF3, impulsamos sus estudios sobre la inmunidad innata y las respuestas antivirales, garantizando un suministro fiable para sus necesidades diagnósticas y de investigación.