Anticuerpo Policlonal de Conejo KPNB1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14974

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de KPNB1

• La subunidad beta-1 de importina (KPNB1), también conocida como carioferina beta-1 o importina-90, funciona como un receptor de transporte nuclear, mediando la importación de proteínas ya sea en asociación con un adaptador de importina-alfa o de forma autónoma al reconocer señales de localización nuclear (NLS) directamente. Referencias relacionadas: PMID:10228156, PMID:11682607, PMID:11891849

• El complejo importina/sustrato se acopla al complejo del poro nuclear (NPC) a través de la unión de KPNB1 a las repeticiones FxFG de nucleoporinas, seguido de una translocación dependiente de energía e impulsada por Ran a través de la envoltura nuclear. Referencias relacionadas: PMID:10228156, PMID:11682607, PMID:11891849

• En el lado nucleoplásmico, la unión de RanGTP disocia el complejo, liberando la carga; luego, las subunidades de importina se reciclan al citoplasma para ciclos de transporte posteriores. Referencias relacionadas: PMID:10228156, PMID:11682607, PMID:11891849

• KPNB1 importa de forma autónoma las proteínas ribosómicas RPL23A, RPS7 y RPL5, y coopera con IPO7 para importar la histona H1; también puede mediar la importación nuclear de las histonas centrales H2A, H2B, H3 y H4 in vitro. Referencias relacionadas: PMID:11682607, PMID:9687515, PMID:10228156

• La carga adicional incluye reguladores de la transcripción como MRTFA, SNAI1 y PRKCI, lo que destaca su amplio papel en el transporte nuclear dependiente de señales. Referencias relacionadas: PMID:11891849, PMID:19386897, PMID:20818336

• Durante la infección por VIH-1, KPNB1 se une y media la importación nuclear de la proteína viral Rev, facilitando la replicación viral.

• La proteína se localiza predominantemente en el citoplasma y en la envoltura nuclear, lo que es consistente con su función en la interfaz nucleocitoplasmática.

• KPNB1 sufre modificaciones postraduccionales que incluyen acetilación, fosforilación y ADP-ribosilación, y el empalme alternativo produce múltiples isoformas.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para Western blot (WB), espere una banda cerca de 97 kDa; incluya controles positivos apropiados (por ejemplo, lisados de HeLa, HEK293) y considere usar un control de carga para la normalización.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), pruebe métodos de recuperación de antígeno (por ejemplo, tampón citrato, Tris-EDTA) y valore la dilución del anticuerpo para minimizar el fondo; se anticipa un patrón de tinción nuclear/citoplasmático.
• Para inmunofluorescencia (IF/ICC), optimice las condiciones de fijación (por ejemplo, PFA al 4%) y permeabilización (por ejemplo, Triton X-100 al 0.1%), y use un anticuerpo secundario adecuado para detectar el primario de conejo.
• Las aplicaciones de ELISA se pueden realizar con recubrimiento indirecto del péptido inmunógeno o de la proteína KPNB1 recombinante; valide las condiciones del ensayo con muestras positivas y negativas conocidas.
• Dado que este es un anticuerpo policlonal, se debe confirmar la consistencia entre lotes al cambiar de lote en estudios a largo plazo.

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