Anticuerpo monoclonal de conejo contra KRAS+HRAS+NRAS para WB, IF/ICC, ELISA - P01111 / P01112 / P01116

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de Pan-Ras (KRAS/HRAS/NRAS)

• La proteína NRas es una pequeña GTPasa que funciona como un interruptor molecular en la vía de señalización Ras-MAPK, controlando la proliferación y supervivencia celular a través del ciclo GDP/GTP y la actividad GTPasa intrínseca (PubMed:30712867). Referencias relacionadas: PMID:30712867

• KRAS, HRAS y NRAS son miembros de la familia clásica Ras, que comparten una alta homología de secuencia; regulan diversos procesos celulares aguas abajo de los receptores de factores de crecimiento, pero cada isoforma puede exhibir funciones distintas y una expresión específica de tejido.

• A nivel subcelular, NRas se localiza en la membrana celular y en la membrana del aparato de Golgi, donde transmite señales extracelulares a efectores intracelulares.

• Las modificaciones postraduccionales, incluyendo la farnesilación, palmitoilación y ubiquitinación, controlan dinámicamente el tráfico y la estabilidad de NRas; por ejemplo, la ubiquitinación mediada por LZTR1 marca a NRas para su degradación proteasomal (PubMed:40934300). Referencias relacionadas: PMID:40934300

• Las mutaciones en NRAS, KRAS y HRAS que bloquean las proteínas en el estado unido a GTP son eventos oncogénicos potentes, lo que convierte a los anticuerpos pan-Ras en herramientas valiosas para la investigación del cáncer y el desarrollo de diagnósticos.

• El anticuerpo fue generado contra una región N-terminal conservada (aa 1-100) de NRAS humano, la cual es altamente idéntica entre las tres isoformas, permitiendo una detección de amplio espectro.

Guía experimental y consejos técnicos

• Basado en el diseño del inmunógeno que se dirige al extremo N-terminal conservado de NRAS (aa 1-100), se espera que el anticuerpo detecte KRAS, HRAS y NRAS; sin embargo, la reactividad específica de la isoforma debe validarse utilizando proteínas recombinantes o líneas celulares knockout.
• Para WB, se observa una banda de aproximadamente 18kDa en condiciones reductoras; utilice controles de carga apropiados y confirme la especificidad con siRNA o sobreexpresión.
• En IF/ICC, considere fijar las células con PFA al 4% y permeabilizar con Triton X-100; optimice la concentración del anticuerpo para minimizar el fondo, ya que los objetivos localizados en la membrana pueden requerir una permeabilización suave.
• Para ELISA, el anticuerpo puede combinarse con reactivos de detección apropiados; asegúrese de que el recubrimiento de la placa capture el antígeno en su conformación nativa para una cuantificación precisa.
• Dado que la señalización de Ras está estrictamente regulada, incluya controles para modificaciones postraduccionales (por ejemplo, inhibidores de la farnesilación) si está investigando la translocación de membrana.

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