Anticuerpo Policlonal de Conejo contra Histona H3 Lactilada (K14) para WB/ELISA (Q16695/P68431)

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Histona H3

La histona H3 es un componente central del nucleosoma, esencial para el empaquetamiento del ADN en cromatina y para regular la accesibilidad del ADN durante la transcripción, la reparación, la replicación y la estabilidad cromosómica. Forma el octámero de histonas junto con H2A, H2B y H4. Referencias relacionadas: UniProt Q16695 | UniProt P68431

Dos isoformas principales representadas por los accesos SWISS son la Histona H3.1t (Q16695), que se expresa específicamente en células testiculares, y la histona canónica H3.1 (P68431), codificada por múltiples genes y ampliamente expresada. Ambas comparten una alta homología de secuencia, incluido el residuo de lisina 14 que es el objetivo de este anticuerpo.

La histona H3 sufre una amplia gama de modificaciones postraduccionales (PTM) que constituyen el código de histonas, influyendo en la expresión génica y la dinámica de la cromatina. Estas PTM incluyen acetilación, metilación, fosforilación, citrulinación y lactilación. La lactilación en residuos de lisina se ha identificado en múltiples posiciones de la histona H3 (p. ej., K10, K19, K24, K28, K57, K80), según se informa en estudios recientes. Referencias relacionadas: PMID:31645732

La localización subcelular de la histona H3 es predominantemente nuclear, donde se asocia con los cromosomas a lo largo del ciclo celular.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno utilizado es un péptido lactilado sintético alrededor de la K14 de la histona H3 humana. Para confirmar la especificidad del anticuerpo, considere usar un péptido no lactilado (control) o realizar ensayos de competencia con péptidos.
• Para Western blot (WB), la histona H3 tiene un peso molecular previsto de aproximadamente 15 kDa, pero la preparación de la muestra y las condiciones de separación (p. ej., extracción ácida o extractos nucleares de alta sal) pueden afectar la detección. Valide el ensayo en el sistema celular o tisular relevante.
• Para ELISA, asegúrese de que el antígeno lactilado se presente correctamente. Los formatos de ELISA directo o sándwich pueden optimizarse utilizando péptidos o proteínas recombinantes.
• Si bien se prevé que el anticuerpo reaccione con una amplia gama de especies (Humano, Ratón, Rata y otras) debido a la conservación de la secuencia alrededor del sitio de modificación, la reactividad cruzada debe confirmarse experimentalmente para cada nueva especie o tipo de muestra.
• Dado que la lactilación de histonas es una PTM dinámica, considere incluir estímulos metabólicos apropiados o condiciones ambientales para enriquecer la modificación antes del análisis.

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