Anticuerpo Policlonal de Conejo MAD1/MAD1L1 para WB, IF/ICC, ELISA - Q9Y6D9

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de MAD1

• MAD1L1 codifica la proteína del punto de control del ensamblaje del huso mitótico MAD1, también conocida como proteína 1 similar a deficiente en arresto mitótico, HsMAD1, hMAD1 y proteína de unión a Tax 181.
• MAD1 es un componente central del punto de control de ensamblaje del huso (SAC), que evita el inicio de la anafase hasta que todos los cromosomas se unen correctamente a los microtúbulos del huso en la placa metafásica. Referencias relacionadas: PMID:10049595, PMID:20133940, PMID:29162720
• En los cinetocoros no unidos, MAD1 forma un complejo heterotetramérico con MAD2L1 en conformación cerrada (C-MAD2) y cataliza la conversión conformacional de MAD2L1 abierto (O-MAD2) a C-MAD2, un paso clave en la generación de la señal difusible de "espera-anafase". Referencias relacionadas: PMID:10049595, PMID:20133940, PMID:29162720
• En el citoplasma, MAD1 puede secuestrar MAD2L1, deteriorando la función del SAC y contribuyendo a la inestabilidad cromosómica en carcinomas hepatocelulares.
• La localización subcelular incluye el núcleo, los cinetocoros, los centrosomas, los polos del huso y el citoplasma, reflejando su papel dinámico durante la mitosis.
• Especificidad de tejido: MAD1 se expresa en carcinomas hepatocelulares y líneas celulares de hepatoma a nivel proteico.
• Modificaciones postraduccionales: MAD1 sufre fosforilación, acetilación y conjugación tipo ubiquitina, lo que puede regular su estabilidad y actividad.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región central (aa 360-700) de MAD1L1 humano, lo que puede permitir el reconocimiento tanto de la longitud completa como de posibles productos de escisión; considere esto al analizar patrones de bandas en WB.
• Para WB, el peso molecular predicho es de ~83 kDa; use controles positivos apropiados como lisados de células HeLa u otras líneas celulares en división activa para confirmar la especificidad.
• Para IF/ICC, se requiere permeabilización para acceder a MAD1 localizado en el núcleo y los cinetocoros; valide la tinción en el sistema de muestra relevante bajo condiciones de arresto mitótico (por ejemplo, tratamiento con nocodazol).
• El rendimiento de ELISA puede depender del tampón de recubrimiento y la presentación del antígeno; considere protocolos estándar de ELISA indirecto con proteína MAD1 recombinante como referencia.

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