MADCAM1 pAb de conejo para WB, IHC-P, ELISA - Q13477

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de MADCAM1

• MADCAM1 (molécula 1 de adhesión celular de dirección mucosa) es un receptor de adhesión celular expresado en las vénulas mucosas, que dirige el tráfico de linfocitos hacia tejidos mucosos como las placas de Peyer y la lámina propia intestinal.
• Se une tanto a la integrina α4β7 como a la L-selectina, regulando así el paso y la retención de leucocitos. La isoforma 2, que carece del dominio similar a mucina, puede estar especializada en el fortalecimiento de la adhesión dependiente de la integrina α4β7, independientemente de la L-selectina.
• La proteína es una glicoproteína transmembranal de tipo I perteneciente a la superfamilia de las inmunoglobulinas, que contiene dominios similares a inmunoglobulinas y una región rica en mucina (en la isoforma canónica).
• Su localización subcelular se produce predominantemente en la membrana plasmática, lo que coincide con su función en las interacciones célula-célula.
• Especificidad tisular: Se expresa en altos niveles en las vénulas endoteliales altas (HEV) y las vénulas de la lámina propia del intestino delgado; su expresión es menor en el colon y el bazo. Presenta una expresión muy baja en páncreas y cerebro; está ausente en el timo, próstata, ovarios, testículo, corazón, placenta, pulmón, hígado, músculo esquelético, riñón y leucocitos de sangre periférica.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación enlazada a N y enlaces disulfuro, esenciales para la integridad estructural y la unión al ligante. Las palabras clave también destacan la disponibilidad de empalme alternativo y estructura 3D.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 100‑200, una región extracelular; tenga en cuenta que el anticuerpo puede reconocer MADCAM1 nativa y desnaturalizada, pero debe validarse la accesibilidad del epitopo en tejidos fijados.
• Para Western blot, se espera una banda alrededor de 40 kDa en condiciones reductoras; utilice marcadores de peso molecular adecuados y verifíquelo con un control positivo (por ejemplo, lisado de tejido intestinal humano).
• En IHC-P, puede ser necesario realizar una recuperación de antígeno (por calor o enzima) para exponer el epitopo; pruebe múltiples métodos de recuperación y diluciones de anticuerpo en tejidos positivos y negativos conocidos.
• Las condiciones de ELISA, como el tampón de recubrimiento y el sistema de detección, deben optimizarse de forma individual; un ensayo de competición con péptidos puede ayudar a confirmar la especificidad.
• Se informa de reactividad cruzada para humano, ratón y rata; para otras especies, realice una alineación de secuencias y pruebas preliminares antes de su aplicación.

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