Anticuerpo monoclonal de conejo MCM5 para WB, IHC-P, IP, ELISA - P33992

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de MCM5

• El factor de licencia de replicación del ADN MCM5 es un componente central del complejo MCM2-7, que funciona como la helicasa replicativa esencial para el inicio y la elongación de la replicación del ADN en células eucariotas.
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  PMID:40940420

• MCM5 es una subunidad integral del complejo helicasa CDC45-MCM-GINS (CMG), la máquina molecular responsable de desenrollar el ADN molde en la horquilla de replicación durante la fase S.
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  PMID:16899510
  PMID:32453425
  PMID:34694004

• La actividad ATPasa del anillo MCM2-7 es aportada por seis sitios activos formados en las interfaces de las subunidades, con un motivo conservado de dedo de arginina proporcionado en trans, aunque estos sitios contribuyen de manera diferencial a la función de la helicasa.
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• Localizado en el núcleo y asociado con los cromosomas, MCM5 juega un papel crítico en garantizar la replicación del ADN una vez por ciclo celular al participar en el ensamblaje del complejo de pre-replicación.

• Las modificaciones postraduccionales de MCM5 incluyen fosforilación, acetilación y conjugación con ubiquitina, que regulan su función y sus interacciones proteicas dentro del sistema de licencia de replicación.

• MCM5 también se conoce por los alias CDC46 y P1-CDC46, lo que refleja su homología con las proteínas del ciclo de división celular de levaduras, y pertenece a la familia MCM de helicasas dependientes de ATP.

• Las mutaciones en MCM5 se han asociado con el síndrome de Meier-Gorlin 8 (MGORS8), un trastorno caracterizado por enanismo primordial y microcefalia, subrayando su papel esencial en la proliferación celular.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 635-734 dentro de la región C-terminal de MCM5 humano (P33992); este epítopo puede ser accesible tanto en condiciones desnaturalizantes como nativas.
• Para western blot, se debe observar una banda esperada alrededor de 82 kDa en lisados celulares totales de líneas celulares humanas, de ratón o de rata; incluir marcadores de peso molecular apropiados y controles de carga.
• En inmunohistoquímica, se recomienda la optimización de los métodos de recuperación antigénica y la dilución del anticuerpo primario para tejidos fijados con formalina e incluidos en parafina, a fin de lograr una tinción nuclear específica.
• El anticuerpo puede ser efectivo para la inmunoprecipitación de MCM5 y la co-inmunoprecipitación de miembros del complejo MCM que interactúan; validar con socios de interacción conocidos.
• Para ELISA, considere usar el anticuerpo como reactivo de captura o detección contra MCM5 recombinante o lisados celulares; el emparejamiento con un clon no superpuesto puede mejorar el rendimiento del ensayo tipo sándwich.

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