Anticuerpo monoclonal de conejo contra MDA5 para WB, IP, ELISA - Q9BYX4

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de MDA5

• MDA5, codificado por el gen IFIH1, es un receptor inmunitario innato que actúa como sensor citoplasmático de ácidos nucleicos virales y desencadena respuestas antivirales, incluida la inducción de interferón de tipo I y citocinas proinflamatorias. Referencias relacionadas: PMID:28594402, PMID:32169843, PMID:33727702
• Sus ligandos incluyen ARN bicatenario largo (>1 kb) y ARNm que carece de 2'-O-metilación en la caperuza 5', lo que permite discriminar entre el ARN propio y el no propio. Referencias relacionadas: PMID:22160685
• Tras la unión al ARN viral, MDA5 experimenta cambios conformacionales y se asocia con MAVS/IPS1 en las mitocondrias, lo que conduce a la fosforilación de IRF3/IRF7 y a la transcripción de genes de interferón.
• MDA5 participa fundamentalmente en la detección de miembros de la familia Picornaviridae (p. ej., el virus de la encefalomiocarditis) y de coronavirus, incluido el SARS-CoV-2. Referencias relacionadas: PMID:28606988, PMID:33440148, PMID:33514628
• La proteína contiene dos dominios CARD en el extremo N-terminal, un dominio helicasa DExD/H-box central con actividad ATPasa y un dominio regulador C-terminal; se localiza predominantemente en el citoplasma, pero también en el núcleo y las mitocondrias.
• Las modificaciones postraduccionales, incluida la fosforilación y la ISGilación, regulan la señalización de MDA5 para prevenir respuestas aberrantes de interferón; las mutaciones están asociadas con el síndrome de Aicardi-Goutières y la diabetes tipo 1.
• Se expresa ampliamente a niveles bajos, con una expresión relativamente mayor en la placenta, el páncreas y el bazo.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para Western blot, se espera que el anticuerpo detecte la proteína IFIH1/MDA5 de longitud completa a aproximadamente 117 kDa; también puede aparecer una banda de 25 kDa debido al splicing alternativo o a la escisión. Validar en el sistema de muestras correspondiente.
• En los ensayos de inmunoprecipitación, tener en cuenta la localización citoplasmática y mitocondrial de MDA5, así como la naturaleza dinámica de sus complejos de activación.
• Para ELISA, este anticuerpo monoclonal recombinante puede utilizarse como reactivo de captura o de detección; combinarlo con un anticuerpo de detección cuidadosamente seleccionado para garantizar la sensibilidad y la especificidad.
• El inmunógeno corresponde a la región N-terminal (aminoácidos 1–205), que incluye los dominios CARD en tándem; esta región está altamente conservada y es esencial para la señalización antiviral.

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