Anticuerpo Policlonal de Conejo Methyl-HP1 gamma/CBX3 (H175) Q13185 para Dot Blot & ELISA

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CBX3 (HP1 gamma)

CBX3, también conocida como HP1 gamma, es un componente de la heterocromatina que reconoce y se une a las colas de la histona H3 metiladas en Lys-9, lo que conduce a la represión epigenética. También se une a la histona H1.4 metilada en Lys-26 (H1.4K26me) y se excluye de la cromatina cuando H1.4 está simultáneamente metilada y fosforilada. Referencias relacionadas: [PMID:11242053] [PMID:16127177]

A través de la interacción con las proteínas del complejo MIS12, CBX3 participa en la formación de cinetocoros funcionales. Contribuye a la conversión de la cromatina local a un estado represivo similar a la heterocromatina mediante la trimetilación de H3 Lys-9 y media el reclutamiento de las metiltransferasas SUV39H1/2 por el complejo PER a los genes diana circadianos como PER2 y PER1. Referencias relacionadas: [PMID:15502821]

CBX3 también media el reclutamiento de NIPBL a sitios de daño en el ADN en roturas de doble hebra, lo que destaca su papel en la reparación del ADN. Referencias relacionadas: [PMID:28167679]

A nivel subcelular, CBX3 es una proteína nuclear que se asocia con la eucromatina y se excluye en gran medida de la heterocromatina constitutiva. También puede asociarse con microtúbulos y polos mitóticos durante la mitosis. Referencias relacionadas: [PMID:28977666]

Las modificaciones postraduccionales de CBX3 incluyen la acetilación N‑terminal, múltiples acetilaciones de lisina y la fosforilación en varios residuos de serina (Ser93, Ser95, Ser97, Ser99, Ser176), que regulan su función e interacciones. Referencias relacionadas: [PMID:19608861] [PMID:16964243] [PMID:20068231] [PMID:21406692] [PMID:18669648] [PMID:24275569] [PMID:23186163]

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno cubre la región N‑terminal (aa 1‑183) de CBX3 humana; considere verificar el reconocimiento del epítopo al usar mutantes de truncamiento o ensayos específicos de isoformas.
• Para dot blot (DB), optimice el bloqueo y la dilución del anticuerpo para minimizar la unión no específica a la membrana. Se recomienda una titulación piloto.
• Para ELISA, asegúrese de que el recubrimiento con antígeno coincida con el epítopo metilado de interés. Valide el ensayo en el sistema de muestra relevante (p. ej., extractos nucleares de líneas celulares humanas).
• Se deben emplear protocolos de extracción nuclear para enriquecer CBX3, ya que es predominantemente una proteína nuclear. Evite condiciones desnaturalizantes severas que puedan alterar el reconocimiento del epítopo específico de metilación.
• Combine con los controles apropiados (p. ej., péptidos CBX3 recombinantes metilados frente a no metilados) para confirmar la especificidad para la modificación metil-H175.
• Este anticuerpo solo se ha probado en muestras humanas; la reactividad cruzada con otras especies no se ha evaluado. Valide en la especie objetivo antes de su uso.

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