Anticuerpo policlonal de conejo para Histona H2B-K5 monometilada (P62807/Q16778) para WB, IF/ICC, ELISA

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la histona H2B

La histona H2B es un componente central del nucleosoma, que empaqueta y compacta el ADN en la cromatina. Esta compactación limita la accesibilidad al ADN y desempeña un papel central en la regulación de la transcripción, la reparación del ADN, la replicación del ADN y la estabilidad cromosómica. La H2B existe en varias isoformas codificadas por genes distintos, y las accesiones UniProt P62807 (Histona H2B tipo 1-C/E/F/G/I) y Q16778 (Histona H2B tipo 2-E) representan las variantes principales.

Más allá de su papel estructural, la H2B tiene una amplia actividad antibacteriana y puede contribuir a la barrera antimicrobiana del epitelio colónico y a la actividad bactericida del líquido amniótico.

La H2B sufre extensas modificaciones postraduccionales que contribuyen al "código de histonas" que regula la dinámica de la cromatina. Las modificaciones incluyen acetilación, metilación, fosforilación, crotonilación y ubiquitinación en múltiples residuos de lisina, serina y arginina. La monometilación específica en la lisina 5 (K5me1) es una de estas marcas que puede influir en la expresión génica y el estado de la cromatina. El anticuerpo descrito aquí se obtuvo frente a un péptido sintético monometilado correspondiente a K5me1 de la H2B humana, proporcionando una herramienta para la investigación epigenética.

La histona H2B se localiza en el núcleo y los cromosomas, lo que coincide con su función nucleosomal.

Referencias relacionadas: Las modificaciones de histonas como la acetilación y la metilación han sido extensamente caracterizadas PMID:16627869. Estudios adicionales han identificado nuevas acilaciones como la crotonilación PMID:21925322 y la lactilación PMID:31645732 en lisinas de H2B.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para la transferencia Western (WB), utilice extractos nucleares para enriquecer las proteínas de histona. La señal de H2B-K5 monometilado puede ser baja; considere realizar ensayos de competición con péptidos para confirmar la especificidad.
• En inmunofluorescencia (IF/ICC), asegure una permeabilización celular adecuada y considere la preextracción de la cromatina para mejorar la accesibilidad del anticuerpo a los blancos de histona.
• Para ensayos basados en ELISA, recubra las placas con el péptido monometilado o los extractos de histona y realice la validación con el anticuerpo.
• El anticuerpo tiene una reactividad cruzada amplia predicha (humano, ratón, rata y otros); sin embargo, verifique la reactividad en su sistema de muestra específico con los controles adecuados.
• Al igual que con cualquier anticuerpo específico para modificaciones postraduccionales, puede producirse variabilidad entre lotes; incluya controles positivos y negativos conocidos en cada experimento.

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