Ac mAb de MonoMetil-Histona H3-K27 de Conejo (Q16695/P68431) – Anticuerpo de Histona H3 Metilada para WB, IF/ICC, ELISA

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Histona H3

• La histona H3 es un componente central del nucleosoma, que envuelve y compacta el ADN en cromatina. Esta estructura limita la accesibilidad del ADN a la maquinaria celular, desempeñando así un papel central en la regulación de la transcripción, la reparación del ADN, la replicación del ADN y la estabilidad cromosómica. La accesibilidad del ADN se regula mediante un conjunto complejo de modificaciones postraduccionales de histonas, también llamado código de histonas, y el remodelado de nucleosomas. Referencias relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

• La histona H3 se localiza en el núcleo y se asocia con los cromosomas. Referencias relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

• Las isoformas canónicas de histona H3.1 (codificadas por múltiples genes) generalmente se expresan en células en división, mientras que la variante H3.1t (Q16695) se expresa específicamente en células testiculares. Referencias relacionadas: UniProt Q16695

• La histona H3 sufre extensas modificaciones postraduccionales, incluyendo metilación, acetilación, fosforilación y citrulinación en residuos específicos. La lisina 27 (K27) es un sitio de modificación conocido; su estado monometilado (H3K27me1) se asocia con la regulación génica. Referencias relacionadas: PMID:16567635

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido monometilado sintético alrededor de la K27, lo que sugiere una alta especificidad para la marca H3K27me1. Al usar el anticuerpo, considere incluir controles de péptidos metilados y no modificados en ensayos de dot blot o ELISA para validar la especificidad.
• Para la transferencia Western (Western blotting, WB), se recomiendan extractos ácidos enriquecidos en histonas o lisados nucleares totales. Se puede usar una cantidad de carga típica de 10–20 µg de extracto nuclear, pero se aconseja la optimización en el sistema de muestra relevante.
• Para inmunofluorescencia/inmunocitoquímica (IF/ICC), es necesaria la permeabilización con Triton X-100 o un detergente similar para permitir la tinción nuclear. La tinción simultánea con un anticuerpo de H3 total puede ayudar a normalizar las señales de metilación.
• Se predice reactividad cruzada en una amplia gama de especies debido a la conservación de la secuencia; sin embargo, siempre valide el anticuerpo en la especie o tejido objetivo si no se ha probado anteriormente.
• Este anticuerpo es aplicable para investigación epigenética centrada en modificaciones de histonas y dinámica de la cromatina; considere su uso en aplicaciones tipo ChIP después de una validación cuidadosa.

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