Anticuerpo monoclonal de conejo MonoMetil-Histona H3-K36 (Q16695/P68431) para WB, DB, IP, ELISA, ChIP

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de MonoMetil-Histona H3-K36

• La histona H3 es un componente central del nucleosoma, que envuelve y compacta el ADN en cromatina. Esta estructura limita la accesibilidad del ADN y juega un papel central en la regulación de la transcripción, la reparación del ADN, la replicación del ADN y la estabilidad cromosómica. La regulación dinámica de la cromatina está mediada en parte por un complejo conjunto de modificaciones postraduccionales de las histonas, denominadas colectivamente como el código de histonas.

• En humanos, múltiples genes codifican variantes canónicas de la histona H3. H3.1 (representada por SWISS P68431 y sus muchos productos génicos como H3C1–H3C12) es la forma predominante dependiente de la replicación. Una variante específica de testículo, H3.1t (SWISS Q16695; también conocida como H3/t o H3.4), se expresa exclusivamente en células testiculares y puede contribuir a la reorganización de la cromatina durante la espermatogénesis.

• La cola N-terminal de la histona H3 sufre extensas modificaciones postraduccionales, incluyendo la metilación de residuos de lisina específicos. La monometilación de la lisina 36 (H3K36me1) es una de esas modificaciones críticas, correspondiente a la metilación de Lys-37 en la secuencia canónica de UniProt. Esta modificación ha sido identificada en múltiples estudios proteómicos. Referencias relacionadas: PMID:15983376, PMID:16185088, PMID:16267050, PMID:16627869, PMID:17194708

• H3K36me1 ha sido implicada en la elongación transcripcional, el empalme de pre-ARNm y la reparación del ADN. La modificación es establecida por metiltransferasas como NSD1, NSD2 y SETD2 (que también pueden catalizar estados de metilación superiores), y es eliminada por histona desmetilasas. Su distribución genómica está típicamente asociada con los cuerpos de genes activos, subrayando su papel en la regulación génica.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno utilizado para generar este anticuerpo es un péptido sintético monometilado centrado en K36 de la histona H3 humana. Al diseñar y validar flujos de trabajo experimentales, considere que el reconocimiento del anticuerpo puede depender del estado de metilación específico (me1) y podría verse influenciado por modificaciones postraduccionales adyacentes. Para aplicaciones de ChIP, asegúrese de que el contexto de cromatina diana y la especificidad del anticuerpo se verifiquen utilizando controles positivos y negativos apropiados.

• En Western blot, la banda proteica esperada es de aproximadamente 15 kDa. Utilice geles de alto porcentaje (por ejemplo, SDS-PAGE 12–15%) y condiciones de transferencia optimizadas (bajo peso molecular) para lograr una resolución clara. Se recomienda incluir un marcador de histonas o un control de H3 total para una identificación precisa.

• Para ELISA y dot blot (DB), incluir péptidos sintéticos que representen H3K36 no metilado, monometilado, dimetilado y trimetilado en el diseño del ensayo puede ayudar a confirmar el reconocimiento específico de la modificación.

• El producto enumera una amplia reactividad cruzada predicha (Humano, Ratón, Rata y otros). Si bien esto sugiere una amplia compatibilidad entre especies, se recomienda encarecidamente la validación con su especie y tipo de tejido específicos, especialmente para aplicaciones no humanas.

• Para todas las aplicaciones, las diluciones de trabajo óptimas y las condiciones deben determinarse experimentalmente utilizando el sistema de muestra relevante.

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