Anticuerpo Policlonal de Conejo MonoMetil-Histona H3-K79 (Q16695/P68431) para WB, IHC, ChIP

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Histona H3

La histona H3 es un componente central del nucleosoma, la unidad repetitiva fundamental de la cromatina. Junto con H2A, H2B y H4, empaqueta el ADN genómico en estructuras compactas, regulando así el acceso para procesos basados en plantillas de ADN, como la transcripción, la replicación, la reparación y la estabilidad cromosómica. La modulación dinámica de la arquitectura de la cromatina se logra a través de una compleja serie de modificaciones postraduccionales en las colas y dominios globulares de las histonas, denominadas colectivamente el "código de histonas". Referencias relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

La histona H3 se localiza principalmente en el núcleo y se asocia con los cromosomas a lo largo del ciclo celular. Referencias relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

Mientras que las variantes canónicas de la histona H3 se expresan de manera ubicua, ciertas isoformas de la histona H3 presentan patrones específicos de tejido. Por ejemplo, la histona H3.1t (H3t), codificada por H3-4 (HIST3H3), se expresa predominantemente en células testiculares. Referencias relacionadas: UniProt Q16695

La histona H3 sufre extensas modificaciones postraduccionales, incluyendo metilación, acetilación, fosforilación, citrulinación y otras, en varios residuos. Entre ellas, la metilación en la lisina 79 (K79) es una marca epigenética conservada, donde los estados de mono-, di- y tri-metilación se asocian cada uno con funciones cromatínicas distintas. Este anticuerpo policlonal se ha desarrollado utilizando un péptido monometilado sintético alrededor de la K79 para detectar específicamente la modificación K79me1.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno se diseñó como un péptido sintético correspondiente a la región que rodea la lisina 79 de la histona H3 humana, que porta un grupo monometil en la K79. Esto asegura una reactividad específica hacia la forma monometilada; la reactividad cruzada con estados no metilados o de metilación superior debe evaluarse en el contexto experimental.
• Para la transferencia Western (Western blotting, WB), considere el uso de histonas extraídas con ácido o fracciones nucleares enriquecidas en cromatina para mejorar la detección, observándose típicamente una migración proteica a ~15 kDa.
• En inmunohistoquímica (IHC-P) e inmunofluorescencia (IF/ICC), valide el anticuerpo bajo condiciones apropiadas de fijación y recuperación de antígenos para el tejido o tipo celular de interés.
• Para inmunoprecipitación de cromatina (ChIP) y secuenciación de ChIP (ChIP-seq), optimice la fragmentación y la cantidad de anticuerpo para la entrada de cromatina específica; se recomienda la inclusión de loci genómicos positivos y negativos para H3K79me1.
• En ensayos basados en ELISA, el anticuerpo puede emplearse para confirmar la especificidad del péptido; valide el rendimiento con un panel de péptidos metilados y no metilados.

CamelBio: Su Puente de Abastecimiento Integral

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