pAb de conejo para MonoMetil-Histona H3-K9 (Q16695/P68431) para WB, ChIP-seq y ELISA

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la histona H3

• La histona H3 es un componente central del nucleosoma, que empaqueta y compacta el ADN en cromatina. Esta función estructural es fundamental para la regulación de la transcripción, la reparación del ADN, la replicación del ADN y la estabilidad cromosómica. Referencias relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431
• Las variantes H3.1 y H3.1t (codificadas por genes como H3C1, H3C2, etc., y H3-4, respectivamente) comparten una alta similitud de secuencia y se localizan en el núcleo y los cromosomas. Referencias relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431
• H3.1t (Q16695) se expresa específicamente en las células testiculares, lo que sugiere un papel especializado en la organización de la cromatina durante la espermatogénesis. Referencias relacionadas: UniProt Q16695
• Las histonas sufren una amplia gama de modificaciones postraduccionales, que incluyen metilación, acetilación, fosforilación y ubiquitinación. La lisina 9 de la histona H3 (H3K9) es un residuo fundamental para la metilación, y los estados de mono-, di- y trimetilación tienen cada uno resultados biológicos distintos. Este anticuerpo se generó contra un péptido sintético monometilado alrededor de K9, lo que permite la detección específica de H3K9me1. Referencias relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431
• La regulación dinámica de la metilación de H3K9 participa en la formación de heterocromatina, la represión transcripcional y la herencia epigenética. La monometilación (H3K9me1) se asocia a menudo con regiones eucromáticas y activación génica, aunque su papel funcional puede variar según el contexto genómico. Referencias relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

Orientación experimental y consejos técnicos

• Para Western blotting (WB), recomendamos usar lisados enriquecidos en fracción nuclear para mejorar la detección de la histona H3. El peso molecular predicho es de ~15 kDa; ajuste el porcentaje de acrilamida del gel y las condiciones de transferencia en consecuencia. Incluya siempre marcadores de peso molecular adecuados.
• Al usar este anticuerpo en aplicaciones basadas en inmunoprecipitación como ChIP y ChIP-seq, verifique la especificidad incluyendo controles negativos (por ejemplo, péptido no metilado, o células/tejido que carezcan de la modificación) y controles positivos (por ejemplo, células que se sabe que contienen H3K9me1). La optimización de la reticulación y la eficiencia de fragmentación son fundamentales.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P) o inmunofluorescencia (IF/ICC), considere los métodos de recuperación de antígeno y los pasos de permeabilización para exponer los epitopos nucleares. Valide la tinción en tejidos positivos y negativos conocidos.
• Dada la amplia reactividad cruzada predicha, se espera que el anticuerpo reconozca H3K9me1 en humano, ratón, rata y otras especies. Aún así, recomendamos confirmar la reactividad en su sistema de muestra específico.

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