Anticuerpo policlonal de conejo contra Histona H4-K20 monometilada (P62805) para investigación epigenética, WB/ELISA

Especificaciones y parámetros principales del producto

Contexto biológico: Función y localización de la histona H4

La histona H4 es un componente central del nucleosoma, que envuelve y compacta el ADN en cromatina. Esto limita la accesibilidad del ADN y desempeña un papel central en la regulación de la transcripción, la reparación del ADN, la replicación del ADN y la estabilidad cromosómica. La accesibilidad del ADN se regula a través de un conjunto complejo de modificaciones postraduccionales, denominado colectivamente código de histonas, y la remodelación de nucleosomas. Referencias relacionadas: UniProt P62805

La histona H4 se localiza en el núcleo y es un componente estructural de los cromosomas. La H4 acetilada se detecta en el núcleo de las espermátidas de etapa 11. Referencias relacionadas: UniProt P62805

La lisina 20 de la histona H4 (que corresponde a la posición 21 en la proteína de longitud completa) sufre mono-, di- y trimetilación. La monometilación en H4K20 se ha relacionado con la compactación de la cromatina, la formación de heterocromatina y la respuesta al daño del ADN. Estas modificaciones añaden diversidad funcional al código de histonas. Referencias relacionadas: PMID:12086618, PMID:15964846, PMID:17967882

La histona H4 está altamente conservada entre las especies, con una amplia gama de otras modificaciones postraduccionales que incluyen acetilación, citrulinación, fosforilación y ubiquitinación en múltiples residuos. Esta conservación convierte a H4 en un objetivo valioso para estudiar la regulación epigenética en diversos organismos modelo. Referencias relacionadas: UniProt P62805

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético monometilado alrededor del K20; se recomienda verificar la especificidad del anticuerpo mediante ELISA de competición con péptidos K20 sin modificar, mono-, di- y trimetilados.
• Para Western blot, se recomienda la extracción ácida de histonas o el fraccionamiento nuclear para enriquecer la histona H4. El peso molecular predicho es de aproximadamente 11 kDa; utilice un gel de SDS-PAGE al 15% o un gel de gradiente para una separación óptima de las histonas de bajo peso molecular.
• Dada la amplia reactividad cruzada predicha (humano, ratón, rata y otros), valide el anticuerpo en el sistema de muestra correspondiente, ya que la intensidad de la señal puede variar según los niveles de metilación endógena.
• Se puede utilizar un ensayo ELISA para cuantificar los niveles relativos de H4K20 monometilado mediante preparaciones de histonas estandarizadas.

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