Anticuerpo policlonal de conejo MonoMetil-NONO/p54nrb (R357/R365) (Q15233) para WB, IF/ICC, ELISA

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de NONO/p54nrb

NONO (proteína de unión al octámero que contiene dominio no-POU), también conocida como p54nrb, es una proteína multifuncional de unión a ADN y ARN que participa en diversos procesos nucleares. Se une tanto a ADN y ARN de doble cadena como de cadena sencilla, participa en el empalme de pre-ARNm probablemente como heterodímero con SFPQ e interactúa con el ARNsn U5. NONO es esencial para la formación de paraspeckles junto con PSPC1, y contribuye a la reparación del ADN a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ) al estabilizar los extremos del ADN con el dímero Ku70/Ku80.

En la regulación transcripcional, NONO forma un complejo con SFPQ y NR5A1 para modular la actividad del promotor CYP17. También regula el reloj circadiano al reprimir la transactivación de CLOCK-BMAL1, influye en la organización de la sinapsis GABAérgica y promueve la diferenciación neuronal al reclutar TET1 a loci genómicos.

NONO desempeña un papel fundamental en la inmunidad innata al ensamblarse en el complejo HDP-RNP, que funciona como plataforma para la fosforilación de IRF3, activando así la vía cGAS-STING en respuesta a la infección por virus de ADN. Durante la infección por VIH-2, NONO interactúa con la proteína de cápside viral p24 para facilitar la detección del ADN viral por parte de cGAS.

Subcelularmente, NONO se encuentra predominantemente en el núcleo, concentrándose en nucléolos, gránulos nucleares y paraspeckles puntiformes adyacentes a los gránulos de empalme.

NONO se expresa ampliamente en corazón, cerebro, placenta, pulmón, hígado, músculo esquelético, riñón, páncreas y diversas líneas celulares de tumor de mama. La proteína sufre extensas modificaciones postraduccionales, que incluyen acetilación, fosforilación y metilación (por ejemplo, monometilación en R456). Este anticuerpo reconoce específicamente la forma monometilada en las argininas 357 y 365.

Referencias relacionadas: PMID:11525732, PMID:12403470, PMID:26571461, PMID:22416126, PMID:15590677, PMID:11897684, PMID:28712728, PMID:30270045, PMID:9341872, PMID:19608861, PMID:24129315

Guía experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo policlonal de conejo se obtuvo a partir de un péptido sintético con monometilación en R357 y R365 de NONO/p54nrb humano. Para Western blot, se espera una banda alrededor de 54 kDa. Valide la especificidad comparando la intensidad de la señal con competición por péptido no metilado o utilizando controles específicos de metilación.
• Para IF/ICC, se puede observar tinción nuclear con enriquecimiento en focos (paraspeckles). Considere la cotinción con marcadores de paraspeckles (por ejemplo, PSPC1) para confirmar la localización.
• Se indica que el anticuerpo reacciona con muestras humanas y de rata. La reactividad cruzada con otras especies no ha sido probada; verifíquela en su sistema modelo.
• Las diluciones de trabajo óptimas deben determinarse empíricamente para cada aplicación. Comience con 1:500–1:1000 para WB y 1:50–1:200 para IF/ICC, ajustando según sea necesario.
• El anticuerpo se proporciona en formato líquido y se envía con bolsa de hielo; almacénelo a −20°C después de su recepción. Evite ciclos repetidos de congelación-descongelación.

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