Ac pAb MonoMethyl-UHRF1-K385 de Conejo (Q96T88) - Anticuerpo de Epigenética para WB, DB, ELISA

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de UHRF1

• UHRF1 (ligasa de ubiquitina-proteína E3 UHRF1) es un regulador epigenético clave que conecta la metilación del ADN y la modificación de la cromatina. Desempeña un papel fundamental en la herencia de los patrones de metilación del ADN al reclutar DNMT1 al ADN hemimetilado durante la replicación, asegurando así la propagación fiel de las marcas de metilación. Referencias relacionadas: PMID:10646863, PMID:15009091, PMID:19056828, PMID:23022729, PMID:24013172, PMID:27595565, PMID:30104358, PMID:30392929, PMID:30392931, PMID:39607687.
• Actuando tanto como lector como escritor de histonas, UHRF1 reconoce específicamente H3K9me3 y H3R2me0, lo que activa su actividad de ligasa de ubiquitina E3. Luego monoubiquitina la histona H3 en Lys-18 (H3K18ub), creando un sitio de acoplamiento para DNMT1. También ubiquitina H3K14 y H3K23 en menor medida. Referencias relacionadas: PMID:15361834, PMID:17673620, PMID:17967883, PMID:18772889, PMID:21745816, PMID:21777816, PMID:22100450, PMID:22837395, PMID:23022729, PMID:27595565, PMID:30104358, PMID:24013172.
• Además de su función en la metilación del ADN, UHRF1 participa en la reparación del ADN cooperando con UHRF2 para asegurar el reclutamiento de FANCD2 a los entrecruzamientos interhebras. También ubiquitina proteínas no histonas como KIF11 y PML, influyendo en la arquitectura del huso y otros procesos. Referencias relacionadas: PMID:30335751, PMID:22945642, PMID:37728657.
• UHRF1 se localiza predominantemente en el núcleo y se asocia con los cromosomas durante la fase S, particularmente en la heterocromatina pericéntrica replicante. En células fuera de la fase S, se distribuye homogéneamente a través del núcleo. Referencias relacionadas: PMID:10646863, PMID:17673620, PMID:17967883, PMID:21777816.
• Se observa expresión tisular en timo, médula ósea, testículo, pulmón y corazón, con sobreexpresión reportada en cáncer de mama. Referencias relacionadas: PMID:10646863, PMID:12838312, PMID:15361834.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para la detección por Western blot, considere enriquecer extractos nucleares o fracciones de cromatina para mejorar la señal de UHRF1 y sus variantes de metilación.
• Dado que el anticuerpo reconoce específicamente K385 monometilado, use controles de péptidos no modificados y metilados diferencialmente en ensayos de dot blot (DB) o ELISA para confirmar la especificidad.
• La expresión y modificación de UHRF1 dependen del ciclo celular; la sincronización de las células en la fase S puede mejorar la detección del objetivo.
• Se informa que el anticuerpo presenta reacción cruzada con UHRF1 de ratón y rata; sin embargo, valide en la especie y el tipo de muestra relevantes para asegurar el rendimiento esperado.
• Optimice las condiciones de bloqueo y lavado, ya que los anticuerpos específicos de metilación pueden requerir un ajuste cuidadoso para minimizar la unión inespecífica.

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