Anticuerpo Policlonal de Conejo MonoMethyl-YAP1-K342 (P46937) para WB y ELISA

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de YAP1

• YAP1 (proteína asociada a Yes 1) funciona como un coactivador y correpresor transcripcional, actuando como un efector descendente fundamental de la vía de señalización Hippo. Esta vía regula críticamente el tamaño de los órganos y suprime la tumorigénesis al restringir la proliferación celular y promover la apoptosis (PMID:17974916, PMID:18280240, PMID:18579750, PMID:21364637, PMID:30447097). Referencias relacionadas: PMID:17974916, PMID:18280240, PMID:18579750, PMID:21364637, PMID:30447097.
• La fosforilación por las quinasas LATS1/2 secuestra YAP1 en el citoplasma, impidiendo su translocación nuclear y la posterior activación de la transcripción dependiente de TEAD. Esta regulación dependiente de la fosforilación es central para su función en el control del crecimiento celular, el crecimiento independiente de anclaje y la transición epitelio-mesénquima (EMT) (PMID:18158288, PMID:26598551, PMID:34404733). Referencias relacionadas: PMID:18158288, PMID:26598551, PMID:34404733.
• YAP1 está sujeta a extensas modificaciones postraduccionales, incluyendo la fosforilación en múltiples residuos de serina, treonina y tirosina, así como la ubiquitinación y la metilación. La metilación de la lisina 342 (K342) es una modificación específica que reconoce este anticuerpo. Aunque no se ha caracterizado extensamente en UniProt, la metilación en este sitio puede influir en las interacciones o estabilidad de YAP1, añadiendo otra capa de regulación a la vía Hippo.
• La localización subcelular de YAP1 se regula dinámicamente; se localiza predominantemente en el núcleo a baja densidad celular y se transloca al citoplasma a alta densidad celular, un proceso modulado por la fosforilación. YAP1 también se asocia con uniones estrechas y la membrana celular en respuesta a señales mecánicas (PMID:18158288, PMID:20048001, PMID:31835537, PMID:25849865). Referencias relacionadas: PMID:18158288, PMID:20048001, PMID:31835537, PMID:25849865.
• El análisis de expresión específica por tejido revela niveles aumentados de YAP1 en ciertos cánceres de hígado y próstata, lo que subraya su potencial oncogénico. Además, se detectan isoformas que carecen del dominio de transactivación en neuronas estriatales de pacientes con enfermedad de Huntington (PMID:16461361, PMID:17974916, PMID:7782338). Referencias relacionadas: PMID:16461361, PMID:17974916, PMID:7782338.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo se generó contra un péptido sintético monometilado correspondiente a los residuos que rodean K342 de YAP1 humana, lo que lo hace específico para la forma metilada. Para una detección óptima en WB, considere el uso de protocolos de fraccionamiento nuclear y citoplasmático para enriquecer YAP1, ya que su localización afecta la abundancia.
• Al realizar ELISA, incluya un control de péptido no metilado para confirmar la especificidad. Un enfoque de ELISA competitivo con péptidos metilados y no metilados puede ayudar a validar la especificidad de la señal.
• Se predice reactividad cruzada para ratón y rata basándose en la homología de secuencia; sin embargo, valide la reactividad en el tejido o línea celular relevante antes de experimentos a gran escala.
• Para WB, las condiciones estándar de bloqueo y detección son adecuadas; sin embargo, si aparecen bandas inespecíficas, considere optimizar la dilución del anticuerpo (p. ej., 1:500-1:2000) y la composición del tampón de bloqueo.

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