Anticuerpo monoclonal de ratón anti-CD15/SSEA-1 humano para citometría de flujo - P22083

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la alfa-(1,3)-fucosiltransferasa 4 (FUT4)

• La alfa-(1,3)-fucosiltransferasa 4 (FUT4) es una glicosiltransferasa residente en el aparato de Golgi que sintetiza el determinante glucídico Lewis X (LeX) (CD15) mediante la transferencia de fucosa en un enlace alfa(1,3) a la N-acetilglucosamina (GlcNAc) presente en cadenas de lactosamina de tipo 2. Referencias relacionadas: PMID:1702034, PMID:1716630, PMID:29593094
• CD15/LeX es un glicóepítopo clave de la superficie celular implicado en la adhesión celular, la migración y el reconocimiento de células inmunitarias, particularmente mediante interacciones con selectinas (SELE, SELL, SELP) durante el tráfico y la recirculación de los leucocitos.
• FUT4 actúa conjuntamente con FUT7 para decorar los ligandos de las selectinas con glucanos fucosilados, un paso fundamental en la recirculación de los linfocitos y las respuestas inflamatorias.
• La enzima también puede modificar aceptores sialilados para generar los determinantes sialil Lewis X y 6‑sulfo sialil Lewis X, que sirven como ligandos de alta afinidad para la misma familia de selectinas. Referencias relacionadas: PMID:1716630, PMID:29593094
• FUT4 se localiza exclusivamente en la membrana medial/trans‑Golgi mediante un anclaje-señal N-terminal, en consonancia con su función en el procesamiento terminal de glucanos.
• Su expresión tisular incluye células madre mesenquimales, linajes mieloides y linfoides, y promielocitos inmaduros, vinculando CD15 tanto con la diferenciación hematopoyética como con la biología de las células madre.
• Además, FUT4 puede fucosilar unidades internas de LacNAc para formar el epítopo VIM‑2, otra estructura de unión a selectinas, diversificando aún más el repertorio de glucanos de la superficie celular. Referencias relacionadas: PMID:11278338, PMID:1716630

Orientación experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo conjugado con está listo para usar en citometría de flujo directa; valore el anticuerpo en un intervalo de 0,5–5 µg/mL para determinar la concentración óptima de tinción para su tipo celular.
• Utilice células humanas vivas y no fijadas (por ejemplo, leucocitos de sangre periférica o líneas celulares cultivadas) para preservar el epítopo de carbohidratos nativo, ya que la fijación puede alterar el reconocimiento de CD15.
• Incluya un control de isotipo adecuado y utilice un bloqueo de los receptores Fc para evaluar la unión inespecífica.
• Si se requiere tinción intracelular del Golgi, deben optimizarse los protocolos de permeabilización para conservar las estructuras de la membrana.

CamelBio: su puente integral de abastecimiento

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