Anticuerpo monoclonal de conejo MYLK para WB, ELISA - Q15746

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de MYLK

• MYLK codifica la quinasa de cadena ligera de miosina, músculo liso (MLCK), una enzima dependiente de calcio/calmodulina también conocida como proteína relacionada con quinasa (KRP) y teloquina.
• Fosforila las cadenas ligeras de miosina (MLC) para regular la contracción del músculo liso y modula la interacción actina-miosina a través de actividad no quinasa.
• Participa en procesos inflamatorios como apoptosis, permeabilidad vascular, diapédesis de leucocitos e hiperreactividad de las vías respiratorias vinculada al asma.
• Promueve la migración celular y la metástasis tumoral a través de mecanismos que incluyen la formación de ampollas de membrana dependiente de RhoA y la activación del canal TRPC5.
• Se localiza en el citoplasma, el lamellipodium, el surco de división y las fibras de estrés, donde controla la dinámica del citoesqueleto.
• Se expresa en músculo liso y varios tejidos fetales/adultos; la isoforma 2 no muscular es la variante de empalme predominante.
• La teloquina se acumula en enterocitos intestinales bien diferenciados en respuesta al TNF, y se requiere actividad quinasa para la motilidad gastrointestinal y la función de barrera epitelial.
• Las características moleculares clave incluyen empalme alternativo, unión a calmodulina, unión a actina, unión a ATP y actividad de serina/treonina-proteína quinasa.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para WB, considere el peso molecular de 211 kDa; utilice geles de SDS-PAGE de bajo porcentaje (por ejemplo, 6-8%) y condiciones de transferencia optimizadas para proteínas de alto peso molecular.
• Valide la especificidad del anticuerpo en lisados de células o tejidos que expresen MYLK, como músculo liso, endotelio o ciertas líneas celulares cancerosas.
• Para ELISA, el emparejamiento con anticuerpos de detección o ensayos de competencia con péptido pueden confirmar el reconocimiento del epítopo; el inmunógeno es un péptido lineal dentro de los residuos 1800-1900.
• Los métodos de fijación y recuperación de antígeno pueden influir en la inmunorreactividad; pruebe condiciones apropiadas para el tipo de muestra.
• Tenga en cuenta que el empalme alternativo genera isoformas como la teloquina (~17 kDa); confirme que la banda objetivo corresponde a MYLK de longitud completa cuando utilice WB.
• La reactividad cruzada reportada es humana; si es necesario, valide el rendimiento con proteínas ortólogas de otras especies.

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