Nanog mAb de conejo - Q80Z64

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la proteína homeobox NANOG

• La proteína homeobox NANOG (también conocida como proteína 4 asociada a células ES, proteína homeobox de tipo NK de expresión específica de embrión temprano, factor de transcripción homeobox Nanog) es un regulador transcripcional crucial para la proliferación y la auto-renovación de la masa celular interna y las células madre embrionarias (ES) (PubMed:25825768). Referencias relacionadas: PMID:25825768
• Imponer pluripotencia en las células ES y evita su diferenciación hacia linajes de endodermo extraembrionario y trofectodermo. Bloquea la diferenciación de mesodermo inducida por proteínas morfogénicas óseas en células ES al interactuar físicamente con SMAD1 e interferir con el reclutamiento de coactivadores a los complejos transcripcionales de SMAD.
• Actúa como activador y represor transcripcional. Se une de forma óptima a las secuencias consenso de ADN 5'-TAAT[GT][GT]-3' o 5'-[CG][GA][CG]C[GC]ATTAN[GC]-3'. Se une al promotor POU5F1/OCT4.
• Autoreprime su propia expresión en células ES en diferenciación: tras la interacción con ZNF281/ZFP281, recluta el complejo NuRD a su propio promotor, lo que conduce a la represión transcripcional.
• Cuando se sobreexpresa, promueve que las células entren en la fase S y la proliferación.
• La localización subcelular es estrictamente nuclear.
• Especificidad tisular: no se expresa en ovocitos y espermatogonias (a nivel de proteína) y está ausente en muchos órganos somáticos, ovario, testículo, fibroblastos y líneas celulares hematopoyéticas.
• El empalme alternativo y las modificaciones postraduccionales clave (por ejemplo, la fosforilación) pueden regular su actividad; se clasifica en palabras clave que incluyen unión a ADN, homeobox, activador, represor, proteína del desarrollo y proteoma de referencia.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno cubre los aminoácidos 160-305 del Nanog de ratón, que incluye el dominio homeobox y regiones adyacentes. Esta región está altamente conservada entre ratón y humano, lo que sustenta la reactividad cruzada observada. Verifique la especificidad en su sistema modelo.
• Para Western blot, se espera una banda específica de ~34 kDa en lisados de células ES de ratón. Utilice controles positivos y negativos apropiados (por ejemplo, NIH/3T3 como control negativo) para confirmar el rendimiento del anticuerpo.
• En ensayos ChIP, este anticuerpo puede ser adecuado para enriquecer loci genómicos unidos a Nanog como el promotor POU5F1; considere la optimización de la reticulación y la titulación del anticuerpo.
• Para citometría de flujo intracelular, asegúrese de una permeabilización adecuada y utilice controles de isotipo correctos. Titule el anticuerpo para determinar la concentración óptima para su tipo celular.

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