Anticuerpo Policlonal de Conejo NFKB1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P19838

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de NFKB1

• NFKB1 codifica el precursor p105, el cual es procesado cotraduccionalmente por el proteasoma para generar la subunidad activa p50 (PubMed:1423592). Referencias relacionadas: PMID:1423592
• La subunidad p50 forma dímeros funcionales de NF-kB al asociarse con otros miembros de la familia Rel, destacando el heterodímero p65-p50, que actúa como un potente activador transcripcional (PubMed:1740106, PubMed:7830764). Referencias relacionadas: PMID:1740106, PMID:7830764
• Los dímeros NF-kB se unen específicamente a la secuencia de consenso de ADN kappa-B (5'-GGRNNYYCC-3') ubicada en las regiones potenciadoras de genes que gobiernan las respuestas inmunes, reacciones de fase aguda, inflamación y supervivencia celular.
• En células no estimuladas, NF-kB se secuestra en el citoplasma por las proteínas inhibidoras I-kB; tras la activación por diversos estímulos, I-kB se fosforila y degrada, liberando a NF-kB para que entre en el núcleo y regule la expresión de genes diana.
• La p105 de longitud completa también funciona como un inhibidor tipo I-kB, reteniendo las proteínas NF-kB asociadas en el citoplasma y modulando la señalización MAPK al reprimir MAP3K8 hasta que su degradación libera MAP3K8 activo.
• Las modificaciones postraduccionales clave de NFKB1 incluyen fosforilación, acetilación, ubiquitinación y S-nitrosilación, las cuales ajustan finamente su actividad transcripcional y estabilidad.
• La localización subcelular es principalmente citoplasmática en células en reposo y nuclear tras la activación de la vía.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo, generado contra un péptido dentro de la región N-terminal común a p105 y p50, se espera que detecte ambas formas; en WB, espere bandas a ~105 kDa (p105) y ~50 kDa (p50) dependiendo del tipo celular y la estimulación.
• Para IHC-P e IF/ICC, las condiciones de recuperación de antígeno y los métodos de fijación pueden requerir optimización; considere probar patrones de tinción tanto citoplasmáticos como nucleares.
• Verifique la especificidad del anticuerpo utilizando controles apropiados, como líneas celulares con knockdown mediado por siRNA o knockout.
• Para aplicaciones de ELISA, confirme que el anticuerpo reconozca las conformaciones nativas de la proteína en su matriz de muestra.
• Ajuste las condiciones de bloqueo y dilución del anticuerpo empíricamente para su sistema experimental.

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