NLRP1 Rabbit pAb para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9C000

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de NLRP1

• NLRP1 (proteína 1 que contiene dominios NACHT, LRR y PYD) es una proteína multidominio también conocida como CARD7, DEFCAP, NAC y NALP1. Sirve como componente sensor del inflamasoma NLRP1, un complejo supramolecular que se ensambla en el citosol en respuesta a señales asociadas a patógenos y media la piroptosis y la liberación de citoquinas inflamatorias. Referencias relacionadas: PMID:12191486, PMID:17349957, PMID:22665479, PMID:22801494, PMID:33852854, PMID:35594856
• Tras la activación, NLRP1 recluta pro-caspasa-1 (proCASP1) a través del adaptador PYCARD/ASC, desencadenando la autoproteólisis de CASP1. La CASP1 activa escinde pro-IL1B, pro-IL18 y gasdermina-D (GSDMD), lo que conduce a la secreción de citoquinas y a la muerte celular piroptótica. En contextos deficientes en GSDMD, los inflamasomas NLRP1 pueden activar CASP8 y gasdermina-E (GSDME). Referencias relacionadas: PMID:12191486, PMID:17349957, PMID:22665479, PMID:33852854, PMID:35594856
• NLRP1 detecta diversas señales asociadas a patógenos y daños: las proteasas 3C del rinovirus humano escinden NLRP1 para activarlo; el ARN de doble hebra (dsRNA) largo actúa como sensor directo; la irradiación UV-B induce colisiones de ribosomas que activan NLRP1 mediante la fosforilación de MAP3K20; y el inhibidor de la dipéptidil peptidasa Val-boroPro también desencadena el inflamasoma. Referencias relacionadas: PMID:33093214, PMID:33243852, PMID:35857590
• NLRP1 se procesa constitutivamente dentro de su dominio FIIND, dando lugar a fragmentos N- y C-terminales asociados de forma no covalente que mantienen un estado autoinhibido. Las señales derivadas de patógenos o daños inducen la ubiquitinación y la degradación proteasómica del fragmento N-terminal, liberando el fragmento C-terminal para oligomerizar y nuclear la formación del inflamasoma. Referencias relacionadas: PMID:33093214, PMID:33731929, PMID:33731932
• La expresión tisular es amplia, con niveles altos en células inmunitarias primarias (neutrófilos, monocitos/macrófagos, células dendríticas, linfocitos) y en epitelios glandulares de los tractos gastrointestinal, respiratorio y reproductivo. También se detecta en la piel (queratinocitos, fibroblastos, folículos pilosos), neuronas del cerebro y células germinales testiculares. Referencias relacionadas: PMID:11113115, PMID:17164409, PMID:15285719, PMID:23349227, PMID:27662089
• A nivel subcelular, NLRP1 se localiza en el citoplasma, citosol y núcleo, y es reclutada al complejo del inflamasoma tras la activación. Se une a ATP y exhibe actividad ATPasa, lo cual puede ser necesario para su función. Referencias relacionadas: PMID:11113115, PMID:15212762, PMID:33243852
• Los roles biológicos clave incluyen la inmunidad innata, la respuesta inflamatoria, la defensa antiviral y la interacción huésped-virus. Las mutaciones en NLRP1 se asocian con enfermedades autoinflamatorias y displasia ectodérmica.

Orientación experimental y consejos técnicos

• Para Western blotting, NLRP1 tiene un peso molecular predicho de ~166 kDa. Utilice un gel de poliacrilamida de bajo porcentaje (p. ej., 6–8%) y tiempos prolongados de transferencia húmeda (toda la noche a bajo voltaje) para garantizar una transferencia eficiente de esta proteína grande. Incluya un marcador preteñido de alto peso molecular como referencia.
• Para IHC-P, se recomienda la recuperación de antígeno ( tampón de citrato o EDTA, inducida por calor). Valide el anticuerpo en su tejido de interés (humano, ratón o rata) con los controles positivos y negativos apropiados, y titule para minimizar el fondo.
• Para IF/ICC, optimice la fijación (p. ej., PFA al 4%) y la permeabilización (p. ej., Triton X-100 al 0,1%) para permitir el acceso al antígeno predominantemente citoplasmático/nuclear. La tinción simultánea con marcadores de orgánulos puede ayudar a confirmar la localización.
• Al tratarse de un anticuerpo policlonal, cada lote puede presentar ligeras variaciones; recomendamos realizar experimentos piloto para establecer las diluciones de trabajo óptimas para su ensayo y sistema de muestra específicos.

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