Anticuerpo policlonal de conejo anti-NLRP3 para WB, IF/ICC, ELISA - Q96P20

Especificaciones y parámetros principales del producto

Información biológica: Función y localización de NLRP3

• NLRP3 (proteína 3 que contiene dominios NACHT, LRR y PYD), también conocida como criopirina, CIAS1 o NALP3, es un miembro de la familia de receptores de tipo NOD (NLR), caracterizada por un dominio pirina N-terminal (PYD), un dominio NACHT central y repeticiones ricas en leucina C-terminales (LRR).
• Como componente sensor del inflamasoma NLRP3, organiza el reclutamiento de ASC (PYCARD) y pro-caspasa-1, lo que conduce a la activación de la caspasa-1, que escinde el pro-IL-1β y el pro-IL-18 en citoquinas maduras y desencadena la piroptosis mediada por gasdermina-D.
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• NLRP3 responde a un amplio espectro de estímulos, que incluyen ATP extracelular, nigericina, cristales de urato monosódico, cristales de colesterol, fibrillas de beta-amiloide y partículas ambientales; estas señales inducen la salida de potasio y la perturbación de la membrana, lo que provoca la translocación de NLRP3 al centro organizador de microtúbulos (MTOC) y a la red trans-Golgi dispersa (dTGN), donde se une al fosfatidilinositol 4-fosfato (PtdIns4P) a través de su región polibásica, facilitando el ensamblaje del inflamasoma.
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• Se expresa principalmente en macrófagos, y también se detecta en células dendríticas, linfocitos B y T, granulocitos, células epiteliales pulmonares, condrocitos y epitelios escamosos estratificados (oral, esofágico, ectocervical y vesical).
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• Las mutaciones de aumento de función en NLRP3 son responsables de los síndromes periódicos asociados a criopirina (CAPS), que incluyen el síndrome autoinflamatorio frío familiar, el síndrome de Muckle-Wells y el CINCA/NOMID, y están asociados con sordera y amiloidosis sistémica.
• La localización subcelular incluye el citosol, el complejo del inflamasoma, la membrana del aparato de Golgi, el retículo endoplásmico y las mitocondrias; además, puede secretarse o encontrarse en el núcleo en determinadas condiciones.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 100–210, que se encuentran dentro del dominio PYD de NLRP3 humano; esta región es relativamente conservada entre especies, lo que coincide con la reactividad cruzada observada con los ortólogos de ratón y rata.
• En Western blot se espera obtener una banda única de aproximadamente 118 kDa en lisados totales de células de macrófagos u otras células que expresen NLRP3.
• Como controles positivos, considere usar células humanas THP-1 tratadas con LPS o macrófagos derivados de médula ósea de ratón, células conocidas por sobreexpresar NLRP3.
• En IF/ICC, las condiciones de permeabilización y fijación pueden necesitar optimización; incluir muestras no estimuladas frente a muestras estimuladas puede ayudar a visualizar la formación de grumos del inflamasoma.
• Valide el rendimiento del anticuerpo en su tipo de muestra y aplicación específicos, ya que la naturaleza policlonal puede generar variabilidad entre lotes; se recomiendan pruebas piloto con los controles adecuados.

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