Anticuerpo monoclonal de conejo PAK1 para WB, IF/ICC, ELISA - Q13153

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de PAK1

• Codificado por el gen PAK1, PAK1 (quinasa 1 activada por p21) es una serina/treonina-proteína quinasa también conocida como alfa-PAK, p65-PAK y PAKalfa. Pertenece a la familia de quinasas PAK que actúan como efectores para las pequeñas GTPasas CDC42 y RAC1.
• PAK1 sirve como un nodo de señalización crítico aguas abajo de las integrinas y los receptores de tirosina quinasa, regulando diversos procesos celulares que incluyen dinámica del citoesqueleto, adhesión celular, migración, proliferación, apoptosis, mitosis y transporte mediado por vesículas (PubMed:10551809, PubMed:11896197, PubMed:12876277). Referencias relacionadas: PMID:10551809 PMID:11896197 PMID:12876277
• Tras la activación por CDC42 y RAC1 unidas a GTP, PAK1 conecta las GTPasas de la familia Rho con la vía de la quinasa MAP JNK y fosforila dianas aguas abajo como MAP2K1, RAF1 y LIMK1, influyendo así en la expresión génica y la remodelación de la actina (PubMed:8805275, PubMed:9528787, PubMed:11733498, PubMed:23633677). Referencias relacionadas: PMID:8805275 PMID:9528787 PMID:11733498 PMID:23633677
• PAK1 se localiza en múltiples compartimentos subcelulares, incluidos el citoplasma, las adhesiones focales, las lamelipodias, los pliegues de membrana, los invadopodios, el nucleoplasma y los centrosomas, lo que es consistente con sus roles pleiotrópicos en la motilidad celular, la adhesión y la señalización nuclear.
• La quinasa juega un papel en la reorganización del citoesqueleto de actina y los complejos de adhesión focal, fosforilando directamente reguladores como la cadena ligera de miosina y la cofilina para modular la contractilidad actomiosina y la forma celular (PubMed:9032240, PubMed:9395435). Referencias relacionadas: PMID:9032240 PMID:9395435
• En las neuronas, PAK1 es esencial para la formación de espinas dendríticas, el desarrollo de sinapsis excitatorias y la transmisión inhibitoria GABAérgica, en parte a través de la estabilización de F-actina y la fosforilación de la cadena ligera reguladora de la miosina II.
• PAK1 ha sido implicado en el cáncer: está sobreexpresado en células y tejidos de cáncer gástrico (PubMed:25766321), promueve la migración e invasión celular y fosforila sustratos involucrados en la remodelación de la cromatina (MORC2, PubMed:23260667) y la transición epitelial-mesenquimal (SNAI1, PubMed:15833848). Referencias relacionadas: PMID:25766321 PMID:23260667 PMID:15833848
• Además, PAK1 participa en la secreción de insulina (PubMed:22669945), la respuesta al daño del ADN y la dinámica de los gránulos de estrés (PubMed:20417602). Referencias relacionadas: PMID:22669945 PMID:20417602

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético que abarca los aminoácidos 1-100 de PAK1 humano, lo que corresponde a la región N-terminal. Es probable que esta región esté conservada entre humano, ratón y rata, lo que es consistente con la reactividad cruzada reportada.
• Para Western blot (WB), el peso molecular predicho de PAK1 es aproximadamente 61 kDa; sin embargo, las modificaciones postraduccionales o las variantes de empalme pueden dar lugar a bandas adicionales. Utilice condiciones reductoras apropiadas y valide con controles positivos conocidos (por ejemplo, lisados de células HeLa o MCF-7).
• En inmunofluorescencia (IF/ICC), PAK1 exhibe una distribución subcelular dinámica, apareciendo en adhesiones focales, pliegues de membrana y el núcleo dependiendo del tipo celular y la estimulación. La fijación con paraformaldehído y la permeabilización con Tritón X-100 o metanol pueden ser adecuadas, pero se recomienda optimizar para su línea celular y condiciones específicas.
• Para ELISA, el anticuerpo puede usarse en formatos directos o indirectos. Considere usar el péptido inmunógeno como control positivo para establecer la sensibilidad y especificidad del ensayo.
• Este anticuerpo no ha sido probado en otras aplicaciones; si se usa para IP, ChIP o bloqueo funcional, se recomienda una validación exhaustiva en el sistema de muestra relevante.

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