Anticuerpo policlonal de conejo anti-PAK1 para WB y ELISA - Q13153

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de PAK1

• PAK1 (quinasa 1 activada por p21), también conocida como alpha-PAK o p65-PAK, es una proteína quinasa de serina/treonina codificada por el gen PAK1 en el cromosoma 11. El corte y empalme alternativo produce múltiples isoformas.
• PAK1 desempeña un papel central en la dinámica del citoesqueleto, la adhesión celular, la migración, la proliferación, la apoptosis y la mitosis al integrar señales procedentes de las integrinas y las tirosina quinasas receptoras (PubMed:10551809, PubMed:11896197, PubMed:12876277). Referencias relacionadas: PMID:10551809, PMID:11896197, PMID:12876277
• Activada por las GTPasas CDC42 y RAC1, PAK1 conecta estas GTPasas de la familia Rho con la vía de la MAP quinasa JNK y también fosforila MAP2K1 para desencadenar cascadas MAPK posteriores (PubMed:8805275, PubMed:9528787). Referencias relacionadas: PMID:8805275, PMID:9528787
• En el citoesqueleto de actina, PAK1 reorganiza las fibras de estrés y los complejos de adhesión focal, y fosforila la cadena ligera de miosina (MYL9/MLC2) para regular la contractilidad actomiosínica (PubMed:9032240, PubMed:9395435). Referencias relacionadas: PMID:9032240, PMID:9395435
• PAK1 protege contra la apoptosis mediante la fosforilación directa de BAD, y también fosforila RAF1, promoviendo su translocación mitocondrial y la fosforilación de BAD (PubMed:11733498). Referencias relacionadas: PMID:11733498
• A nivel subcelular, PAK1 se localiza en el citoplasma, las adhesiones focales, los lamelipodios, las membranas onduladas, los invadopodios, el nucleoplasma y el centrosoma, lo que refleja sus diversas funciones.
• PAK1 se sobreexpresa en células y tejidos de cáncer gástrico, y contribuye a la migración y la invasión de las células cancerosas mediante vías mediadas por RUFY3 (PubMed:25766321). Referencias relacionadas: PMID:25766321
• Entre sus funciones adicionales se incluyen la regulación de la secreción de insulina, la remodelación de la cromatina, la estabilidad sináptica de los receptores GABA(A) y la formación de espinas dendríticas, lo que pone de manifiesto sus funciones pleiotrópicas (PubMed:22669945, PubMed:23260667). Referencias relacionadas: PMID:22669945, PMID:23260667

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 130-250 de PAK1 humano, una región que puede estar conservada entre especies; se ha confirmado la reactividad cruzada con rata, pero las especies adicionales deben validarse individualmente.
• Para la transferencia Western (WB), se espera una banda de aproximadamente 61 kDa; sin embargo, el corte y empalme alternativo y las modificaciones postraduccionales pueden producir múltiples bandas. Considere utilizar lisados celulares completos de líneas celulares humanas o de rata que expresen PAK1, como HeLa o A431.
• Para aplicaciones de ELISA, titule el anticuerpo frente al inmunógeno recombinante o la proteína nativa en una matriz adecuada; las diluciones de trabajo óptimas deben determinarse empíricamente.
• Dado el papel de PAK1 en la apoptosis y la migración, controle las condiciones del cultivo celular (por ejemplo, la privación de suero y la confluencia), ya que pueden influir en los niveles de expresión.

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