Anticuerpo Policlonal de Conejo Pan-Akt para WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P31749/P31751/Q9Y243

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de Pan-Akt (AKT1/AKT2/AKT3)

• AKT1 es una quinasa serina/treonina perteneciente a la familia de quinasas AKT (que incluye AKT1, AKT2, AKT3) que regula el metabolismo, la proliferación, la supervivencia celular, el crecimiento y la angiogénesis. Referencias relacionadas: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• Media la captación de glucosa inducida por insulina a través de la translocación de SLC2A4/GLUT4 y regula la síntesis de glucógeno inhibiendo GSK3A y GSK3B.
• AKT1 promueve la supervivencia celular mediante la fosforilación de MAP3K5/ASK1 en 'Ser-83', inhibiendo la apoptosis inducida por estrés oxidativo. Referencias relacionadas: PMID:11154276
• Activa la señalización de mTORC1 fosforilando TSC2, lo que conduce a la síntesis de proteínas y al crecimiento celular. Referencias relacionadas: PMID:12150915, PMID:12172553
• AKT1 fosforila los factores de transcripción FOXO (FOXO1, FOXO3, FOXO4), resultando en su retención citoplasmática e inhibición de sus funciones proapoptóticas. Referencias relacionadas: PMID:10358075
• Regula positivamente la transcripción dependiente de NF-kappa-B y la actividad de CREB1, mejorando la expresión de genes de prosupervivencia (por ejemplo, BCL2, MCL1). Referencias relacionadas: PMID:9829964
• Subcelularmente, AKT1 se localiza en el citoplasma, núcleo, membrana celular y espacio intermembrana mitocondrial, lo que refleja sus diversas funciones de señalización.
• Las modificaciones postraduccionales clave incluyen fosforilación (activación), acetilación, glicoproteína y ubiquitinación, como se destaca en las palabras clave de UniProt.
• AKT1 se expresa de forma ubicua en tejidos humanos, con niveles elevados en cánceres de próstata y mama, particularmente la forma fosforilada en Tyr-176 durante la progresión del cáncer de mama.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno abarca una región conservada (aa 311-480) de AKT1, AKT2 y AKT3 humano, lo que predice una amplia reactividad pan-Akt a través de la familia AKT.
• Para transferencia Western (western blotting), considere múltiples bandas correspondientes a las isoformas de AKT: ~48 kDa (AKT1), ~55 kDa (AKT2) y ~51/54 kDa (AKT3). Valide la especificidad de las bandas utilizando controles específicos de isoforma o silenciamiento con siRNA.
• Para inmunofluorescencia/inmunohistoquímica, la fijación con metanol o formaldehído suele ser adecuada; sin embargo, puede ser necesaria la permeabilización para dianas intracelulares.
• Como es un anticuerpo policlonal, anticipe variabilidad de lote a lote en el título y afinidad; es recomendable titular el anticuerpo para cada nuevo lote y aplicación.
• En inmunoprecipitación, utilice perlas de proteína A/G para una captura óptima de IgG de conejo.
• Las aplicaciones de ELISA pueden requerir un tampón de recubrimiento y un sistema de detección optimizados; pruebe múltiples concentraciones para maximizar la relación señal/ruido.

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