Anticuerpo monoclonal de conejo anti-calreticulina humana conjugado con PE para citometría de flujo intracelular - P27797

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la calreticulina

• La calreticulina (CALR, también conocida como CRP55, Calregulina, ERp60, HACBP, grp60) es una chaperona de unión al calcio altamente conservada, localizada principalmente en la luz del retículo endoplásmico (RE).
• Actúa como componente central del ciclo calreticulina/calnexina, promoviendo el plegamiento, el ensamblaje oligomérico y el control de calidad de las glucoproteínas recién sintetizadas mediante su unión a glucanos N-enlazados monoglucosilados (PubMed:7876246). Referencias relacionadas: PMID:7876246
• La calreticulina interactúa con el dominio de unión al ADN del receptor de glucocorticoides (NR3C1) y media su exportación nuclear, vinculando así la función del RE con las vías de señalización citoplasmáticas (PubMed:11149926). Referencias relacionadas: PMID:11149926
• Además del RE, la calreticulina se localiza en el citosol, la superficie celular, la matriz extracelular y las vesículas secretoras; también se detecta en el retículo sarcoplásmico, los gránulos corticales y los gránulos citolíticos, lo que refleja sus funciones multifacéticas.
• Participa en la homeostasis del calcio, la adhesión celular y la regulación de la expresión génica, y se ha implicado en la maduración de los ovocitos y en el bloqueo de la polispermia.
• Entre las modificaciones postraduccionales se incluyen la acetilación, la hidroxilación y un enlace disulfuro conservado; la proteína tiene un peso molecular aproximado de 48 kDa y contiene un péptido señal, dominios de unión a lectinas y sitios de unión a metales.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región C-terminal (aminoácidos 335–417) de la calreticulina humana; verifique que este epítopo sea accesible en su protocolo específico de fijación y permeabilización para citometría de flujo intracelular.
• Dado que este anticuerpo está conjugado con PE y se recomienda para tinción intracelular, considere optimizar las condiciones de permeabilización e incluir controles de isotipo adecuados para tener en cuenta el posible fondo causado por receptores Fc intracelulares o por unión inespecífica.
• La calreticulina se expresa en múltiples compartimentos subcelulares; valide la especificidad de la tinción comparando los patrones de localización en el RE, el citosol o la superficie celular, según el contexto experimental.
• Para aplicaciones distintas de la citometría de flujo intracelular, se recomienda encarecidamente realizar pruebas piloto, ya que este anticuerpo solo está validado para la aplicación indicada en las condiciones del proveedor.

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