Anticuerpo Monoclonal de Conejo anti-Humano CD117/c-Kit conjugado con PE para Citometría de Flujo - P10721

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CD117/c-Kit

• CD117, también conocido como c-Kit, SCFR o PBT, es un receptor transmembrana de tirosina-proteína quinasa codificado por el gen KIT; el splicing alternativo produce múltiples isoformas (UniProt: P10721).
• El ligando principal es el factor de células madre (SCF/KITLG). La unión del ligando induce la dimerización del receptor y la autofosforilación, activando cascadas de señalización descendente que regulan la supervivencia, proliferación y diferenciación celular en la hematopoyesis, melanogénesis, gametogénesis y desarrollo de células cebadas.
• CD117 activado recluta y fosforila proteínas adaptadoras y enzimas clave, incluyendo PIK3R1 (PI3K), GRB2 y PLCG1, lo que lleva a la activación de las vías AKT, RAS/MAPK y STAT (STAT1, STAT3, STAT5), así como a la producción de segundos mensajeros DAG e IP3.
• CD117 se localiza predominantemente en la membrana celular, pero también se puede encontrar en el citoplasma tras la internalización y el tráfico.
• En el testículo, CD117 se detecta en espermatogonias de la capa basal y en células intersticiales de Leydig, y su expresión se mantiene en los espermatozoides eyaculados (a nivel proteico). Referencias relacionadas: PMID:20601678
• La proteína está muy glicosilada, contiene dominios de inmunoglobulina extracelulares y un dominio de quinasa intracelular, y se clasifica como un protooncogén; los enlaces disulfuro y la fosforilación son características estructurales y funcionales clave.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo está conjugado directamente con PE, lo que lo hace adecuado para la detección por citometría de flujo en un solo paso de CD117 sin necesidad de un anticuerpo secundario.
• El inmunógeno corresponde a la región extracelular (aa 26-520) del CD117 humano, lo que sugiere reactividad con el receptor de superficie nativo.
• Para citometría de flujo, titre el anticuerpo para determinar la concentración óptima para su tipo celular e instrumento específicos; incluya controles de isotipo apropiados y pasos de bloqueo de receptores Fc para minimizar la unión inespecífica.
• Valide la expresión en líneas celulares humanas conocidas como CD117-positivas (p. ej., TF-1, HMC-1) o en células hematopoyéticas primarias.
• Dado que CD117 puede ser internalizado tras la estimulación del ligando, considere el momento de la fijación y la tinción al analizar células activadas.

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