PE Anticuerpo monoclonal de conejo anti-Humano CD170/Siglec-5 - O15389

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CD170/Siglec-5

• SIGLEC5 codifica la lectina tipo inmunoglobulina de unión al ácido siálico 5, también conocida como CD170, antígeno tipo CD33 2 (CD33L2) y proteína de unión a la obesidad 2 (OB-BP2).
• Funciona como una molécula de adhesión putativa que media la unión dependiente del ácido siálico a las células, reconociendo tanto el ácido siálico unido alfa-2,3 como alfa-2,6 con igual afinidad.
• El sitio de reconocimiento del ácido siálico puede estar enmascarado por interacciones cis con ácidos siálicos en la misma superficie celular, regulando potencialmente su función adhesiva.
• SIGLEC5 es un miembro de la familia de lectinas tipo inmunoglobulina de unión al ácido siálico (SIGLEC), caracterizada por un dominio Ig tipo V-set en el extremo N-terminal y múltiples dominios Ig tipo C2-set.
• A nivel subcelular, es una proteína transmembrana con un péptido señal, una región extracelular, una hélice transmembrana y una cola citoplasmática.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen enlaces disulfuro y glicosilación de tipo N, típicas de los receptores de superficie celular.
• Especificidad de tejido: Expresado por células de linaje monocítico/mieloide, con niveles altos en leucocitos de sangre periférica, bazo, médula ósea y niveles más bajos en ganglio linfático, pulmón, apéndice, placenta, páncreas y timo. Está presente en monocitos y neutrófilos pero ausente en líneas celulares de leucemia en etapa temprana.
• La proteína madura tiene un peso molecular predicho de aproximadamente 61 kDa.

Guía experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo está conjugado directamente a PE, lo que permite su uso inmediato en citometría de flujo sin un paso de detección secundario. Asegure los controles de compensación adecuados al utilizar múltiples fluoróforos.
• El inmunógeno corresponde a la región extracelular (aminoácidos 17-434), dirigido al dominio de unión al ácido siálico. Se espera que esta región sea accesible en células vivas no permeabilizadas.
• Para citometría de flujo, valide la tinción en monocitos o neutrófilos de sangre periférica humana, que expresan naturalmente CD170/Siglec-5. Considere el uso de una línea celular mieloide como control positivo.
• Dado que las interacciones cis con ácidos siálicos de la superficie celular pueden enmascarar el epítopo, considere tratar las células con sialidasa antes de la tinción para desenmascarar CD170/Siglec-5, especialmente si se observan señales débiles.
• Utilice un control de isotipo de conejo conjugado a PE apropiado para distinguir la unión específica del fondo.
• El anticuerpo está validado para reactividad humana; la reactividad cruzada con otras especies no se ha confirmado. Pruebe en muestras de la especie deseada si se usa más allá de lo humano.

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