Anticuerpo monoclonal PE de conejo anti-CD177 humano para FC - Q8N6Q3

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CD177

• CD177 (también conocido como glicoproteína NB1, PRV-1, HNA-2a) es una glicoproteína de superficie celular anclada a GPI que se expresa en un subconjunto de neutrófilos maduros.
• En asociación con el heterodímero de integrina beta-2 ITGAM/CD11b e ITGB2/CD18, CD177 media la activación de neutrófilos estimulados con TNF, incluyendo la desgranulación y la producción de superóxido. Referencias relacionadas: PMID:21193407
• CD177 previene la internalización de la integrina beta-2 y atenúa la señalización de quimiocinas, cambiando la respuesta de los neutrófilos de migración a adhesión. Referencias relacionadas: PMID:28807980
• Gracias a la interacción heterofílica con PECAM1 en células endoteliales, CD177 facilita la migración transendotelial de neutrófilos in vitro. Referencias relacionadas: PMID:17580308
• A pesar de su papel en la migración transendotelial in vitro, CD177 parece no ser indispensable para el reclutamiento de neutrófilos durante infecciones bacterianas in vivo. Referencias relacionadas: PMID:23461681
• CD177 actúa como receptor de la forma madura de la proteasa PRTN3, exponiéndola en la superficie celular de los neutrófilos. Referencias relacionadas: PMID:17244676 PMID:18462208
• Al presentar PRTN3 en la superficie de los neutrófilos, CD177 puede mejorar la integridad de las uniones de células endoteliales durante la diapédesis de neutrófilos. Referencias relacionadas: PMID:23202369
• CD177 se localiza en la membrana celular, balsas lipídicas de membrana, vesículas secretoras, membranas de gránulos citoplasmáticos y lamélipodios.
• CD177 se expresa de forma alta en la médula ósea normal y en granulocitos de pacientes con policitemia vera y trombocitemia esencial. La expresión comienza en la etapa de metamiélocito durante la diferenciación de neutrófilos, y el porcentaje de neutrófilos positivos para CD177 varía ampliamente entre individuos.
• La proteína sufre empalme alternativo y posee un anclaje GPI, por lo que su peso molecular varía entre isoformas.

Guía experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo se genera contra un inmunógeno que abarca los aminoácidos 22-407, correspondiente al dominio extracelular de CD177 humano. Esta región está bien expuesta en células vivas, por lo que el anticuerpo es adecuado para la detección de CD177 de superficie celular por citometría de flujo.
• Para citometría de flujo (FC), utilice controles de isotipo adecuados y valore por titulación el anticuerpo para determinar las concentraciones óptimas de tinción. Incluya una estrategia de gating de neutrófilos (por ejemplo, co-tinción con CD16 y CD66b) para identificar las poblaciones que expresan CD177.
• Dado que CD177 se expresa solo en un subconjunto de neutrófilos y los niveles de expresión varían entre individuos, se recomienda analizar una cohorte de donantes y reportar el porcentaje de positividad en lugar de números absolutos de células.
• Se recomienda la pre-incubación con reactivos de bloqueo de receptores Fc para minimizar la unión no específica a los receptores Fcγ de los neutrófilos.
• Este anticuerpo conjugado con PE está listo para usar; evite ciclos repetidos de congelación-descongelación y protéjalo de la luz para preservar la fluorescencia.
• La reactividad cruzada se ha confirmado en muestras humanas. Para su uso con otras especies, valide la unión y especificidad de forma independiente.

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